[發(fā)明專利]核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410090342.7
• 申請日: 2014-03-12
• 公開（公告）號: CN104046558A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 齊藤祐司;高城富美男
• 申請（專利權(quán)）人: 精工愛普生株式會社
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 金世煜;苗堃

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒(Cartridge)。

背景技術(shù)

Boom等人報告了使用二氧化硅粒子等核酸結(jié)合性固相載體和離液劑從生物體材料更簡便地提取核酸的方法（參照非專利文獻(xiàn)1）。包括該Boom等人的方法的使用二氧化硅等核酸結(jié)合性固相載體和離液劑使核酸吸附于載體而提取的方法主要由以下3個工序構(gòu)成：（1）在離液劑存在下，使核酸吸附于核酸結(jié)合性固相載體的工序（吸附工序），（2）為了除去非特異性結(jié)合的夾雜物和離液劑，用清洗液清洗吸附了核酸的載體的工序（清洗工序），以及（3）用水或低鹽濃度緩沖液使核酸從載體溶出的工序（溶出工序）。

然而，最近，除了以往的PCR裝置以外，也開發(fā)有容易控制加熱時間的熱循環(huán)裝置（參照專利文獻(xiàn)1），但至今尚未開發(fā)出能夠適用于這些裝置的筒等。

專利文獻(xiàn)1：日本特愿2010－268090

非專利文獻(xiàn)1：J.Clin.Microbiol.,vol.28No.3,p.495-503（1990）

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供能夠簡便地進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒。

本發(fā)明的一個實(shí)施方式的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒，具備管、核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器以及柱塞，所述管在內(nèi)部依次具備由第1油構(gòu)成的第1塞子（plug），由與油混合時相分離且清洗結(jié)合有核酸的核酸結(jié)合性固相載體的第2清洗液構(gòu)成的第2塞子，由第2油構(gòu)成的第3塞子，由與油混合時相分離且進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液構(gòu)成的第4塞子，由第3油構(gòu)成的第5塞子，由與油混合時相分離且從核酸結(jié)合的核酸結(jié)合性固相載體溶出上述核酸的溶出液構(gòu)成的第6塞子和由第4油構(gòu)成的第7塞子；所述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器，與上述管的第7塞子側(cè)連通且含有油；所述柱塞安裝于上述管的第1塞子側(cè)的開口部，從管的第7塞子側(cè)向上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器推出液體。該筒中，上述管也可以進(jìn)一步在第5塞子與第6塞子之間，從第5塞子側(cè)依次具備由與油混合時相分離且清洗結(jié)合有核酸的核酸結(jié)合性固相載體的第3清洗液構(gòu)成的第10塞子和由第6的油構(gòu)成的第11塞子。上述管還可以進(jìn)一步在第7塞子的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器側(cè)，從第7塞子側(cè)依次具備與油混合時相分離且含有進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的試劑的核酸擴(kuò)增反應(yīng)液構(gòu)成的第8塞子和由第5油構(gòu)成的第9塞子。上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器還可以含有由與油混合時相分離且含有進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的試劑的核酸擴(kuò)增反應(yīng)液構(gòu)成的液滴。進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的試劑也可以不包含在上述溶出液。上述用于進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的試劑優(yōu)選含有DNA聚合酶、dNTP、引物。

上述任一筒中可以在上述柱塞的內(nèi)部收容有油和與油混合時相分離且清洗結(jié)合有核酸的上述核酸結(jié)合性固相載體的第1清洗液。另外，上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器可以具有固定上述管的密封形成部和供液滴移動的流路形成部。優(yōu)選上述密封形成部具有接受從上述流路形成部溢出的油的油接受部。

上述任一筒中可以進(jìn)一步具備與上述管的第1塞子側(cè)連通的、向上述管導(dǎo)入上述核酸結(jié)合性固相載體的罐。優(yōu)選上述罐與上述管介由上述柱塞結(jié)合。

本發(fā)明的一個實(shí)施方式的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒試劑盒具備上述任一核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒和向上述管導(dǎo)入上述核酸結(jié)合性固相載體的罐。上述罐可以含有提取核酸的溶解液和上述核酸結(jié)合性固相載體。上述罐可以具有開口部，在上述開口部具有可拆的蓋。上述罐的開口部可以構(gòu)成為能夠安裝在上述管的第1塞子側(cè)的開口部。

根據(jù)本發(fā)明，能夠提供簡便地進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒。

附圖說明

圖1的圖1A～圖1C是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的筒1的說明圖。

圖2的圖2A～圖2C是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的筒1的動作說明圖。

圖3的圖3A～圖3D是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的罐3的說明圖。

圖4是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的固定爪25以及導(dǎo)板26和安裝部62的說明圖。

圖5的圖5A和圖5B是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的PCR容器30的周邊的說明圖。

圖6的圖6A是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的PCR裝置100的內(nèi)部構(gòu)成的立體圖。圖6B是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的PCR裝置100的主要構(gòu)成的側(cè)視圖。

圖7是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的PCR裝置100的框圖。

圖8的圖8A是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的旋轉(zhuǎn)體61的說明圖。圖8B是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的在旋轉(zhuǎn)體61的安裝部62安裝了筒1的狀態(tài)的說明圖。

圖9的圖9A～圖9D是本發(fā)明的一個實(shí)施方式中的安裝筒1時的PCR裝置100的狀態(tài)的說明圖。