[發明專利]一種細菌纖維素生物補片及其制造方法

有效

• 申請號: 201410089918.8
• 申請日: 2014-03-13
• 公開（公告）號: CN103861146A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 奚廷斐;賴琛;張志雄;盛立遠;鐘春燕
• 申請（專利權）人: 海南光宇生物科技有限公司
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/50;A61L27/54;C12P19/04;C12R1/02
• 代理公司: 深圳匯智容達專利商標事務所(普通合伙) 44238
• 代理人: 陳小耕

1.一種細菌纖維素生物補片，該生物補片由細菌纖維素膜即BC膜構成，其特征在于：所述細菌纖維素的聚合度在2000～20000范圍，該纖維素結晶的晶型為I型，結晶指數為50～95%，晶胞參數中a=0.815nm，b=1.025nm,c=0.832nm,β=85度。

2.如權利要求1所述細菌纖維素生物補片，其特征在于：I晶型中Iα型態的比率為50–85%。

3.如權利要求1或2所述細菌纖維素生物補片，其特征在于：所述細菌纖維素膜干膜密度為1.08–2.35g?cm^-3；而其持水潤濕后，細菌纖維素的重量比率為0.14-15%，水份比率為85–99.86%（wt）。

4.如權利要求1或2所述細菌纖維素生物補片，其特征在于：水份潤濕后所述纖維素膜的厚度為：0.1～1.0mm，單根纖維素的直徑為5～20nm，纖維素束的直徑在10～80nm范圍。

5.如權利要求1或2所述細菌纖維素生物補片，其特征在于：水份潤濕后所述細菌纖維素膜的最大應變εm:45.7～54.8%,最大斷裂強度σm：8.24～11.940Mpa，最大抗拉強度Sm：20.73～27.865N/cm。

6.如權利要求1或2所述細菌纖維素生物補片，其特征在于：水份潤濕后，所述BC膜對白蛋白的吸附量與其對纖維蛋白原的吸附量之比為0.86～1.72；所述BC膜吸附白蛋白和纖維蛋白原的吸附平衡時間為1-2小時。

7.一種如權利要求1-6之一所述細菌纖維素生物補片的制造方法，是選擇紅螺菌目即Rhodospirillales下屬的醋桿菌科即Acetobacteraceae下屬的醋桿菌屬即Acetobacter下屬的木醋桿菌Acetobacter?xylinum作為菌株，所述制造方法包括如下步驟：

A）振蕩培養：將正常活化菌株接入滅菌冷卻后的培養基中，在30℃±2℃下振蕩培養24–36小時；

B）分散菌株：振蕩培養之后，培養基置于搖床以轉速為150～200rpm,，充分分散菌株；

C）靜置培養：分散操作之后，培養基在30℃±2℃下恒溫靜置培養3～4周；

D）過濾取膜：靜置培養后，再從培養基中取出BC生成膜，通過不銹鋼絲網膜過濾得BC濾后膜；

E）清洗制膜：BC濾后膜浸泡在1–4%（wt）NaOH溶液中，在90–100℃沸水中加熱1–3小時，去除菌體蛋白和粘附在纖維素膜上的殘余培養基，用稀鹽酸中和，繼而用去離子水反復沖洗至中性，制得所述BC膜成品。

8.如權利要求7所述細菌纖維素生物補片的制造方法，其特征在于：所述步驟A之前還包括如下步驟A0）菌株活化：將冷凍保藏菌株，在盛有活化營養液培養基中進行活化，然后進行后續培養；所述步驟E中清洗操作后，還包括干燥操作。

9.如權利要求7所述細菌纖維素生物補片的制造方法，其特征在于：所述步驟A的培養基營養液包括如下組份：(NH₂)₂SO₄：2～4g/L,MgSO₄：0.1～0.6g/L,KH₂PO₄：1～3g/L,NaAc：1～2g/L,蔗糖：10～40g/L，椰子水：400～600g/L；上述培養基營養液控制pH=4.2、100℃下滅菌15min。

10.如權利要求8所述細菌纖維素生物補片的制造方法，其特征在于：所述步驟A0的活化營養液包括如下組份：蔗糖2%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.5%，磷酸氫二鈉0.27%，檸檬酸0.115%；上述活化營養液控制pH＝6.0、115℃下滅菌15min。