[發(fā)明專利]核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410089111.4
• 申請(qǐng)日: 2014-03-12
• 公開（公告）號(hào): CN104046555A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 齊藤祐司;高城富美男
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 精工愛普生株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C12M1/00
• 分類號(hào): C12M1/00
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 金世煜;苗堃

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒。?

背景技術(shù)

由Boom等人報(bào)告了使用二氧化硅粒子等核酸結(jié)合性固相載體和促溶劑從生物體材料更簡(jiǎn)便地提取核酸的方法（參照非專利文獻(xiàn)1）。包括該Boom等人的方法在內(nèi)并使用二氧化硅等核酸結(jié)合性固相載體和促溶劑使核酸吸附于載體并進(jìn)行提取的方法主要由以下3個(gè)工序構(gòu)成：（1）在促溶劑存在的條件下，使核酸吸附于核酸結(jié)合性固相載體的工序（吸附工序）；（2）為了除去非特異性結(jié)合的夾雜物和促溶劑，用清洗液清洗吸附有核酸的載體的工序（清洗工序）；以及（3）用水或低鹽濃度緩沖液使核酸從載體溶出的工序（溶出工序）。?

然而，最近，除以往的PCR裝置以外，還開發(fā)了容易控制加熱時(shí)間的熱循環(huán)裝置（參照專利文獻(xiàn)1），但迄今為止尚未開發(fā)可適用于這些裝置的筒等。?

專利文獻(xiàn)?

專利文獻(xiàn)1：日本特愿2010-268090?

非專利文獻(xiàn)?

非專利文獻(xiàn)1：J.Clin.Microbiol.,vol.28No.3,p.495-503（1990）?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種能夠簡(jiǎn)便地進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒。?

作為本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒具備管、核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器和柱塞，上述管在其內(nèi)部依次具備由第1油構(gòu)成的第1塞子?（plug）、由與油混合時(shí)發(fā)生相分離且清洗結(jié)合有核酸的核酸結(jié)合性固相載體的第2清洗液構(gòu)成的第2塞子、由第2油構(gòu)成的第3塞子、由與油混合時(shí)發(fā)生相分離且將上述核酸從結(jié)合有核酸的核酸結(jié)合性固相載體溶出的溶出液構(gòu)成的第4塞子、由第3油構(gòu)成的第5塞子；上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器與上述管的第5塞子側(cè)連通且含有油；上述柱塞被安裝于上述管的第1塞子側(cè)的開口部，將液體從管的第5塞子側(cè)向上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器推出。在上述柱塞的內(nèi)部可以收容油和與油混合時(shí)發(fā)生相分離且清洗結(jié)合有核酸的上述核酸結(jié)合性固相載體的第1清洗液。另外，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的試劑可以被包含在上述溶出液中。進(jìn)行上述逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的試劑可以含有逆轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、引物。進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的試劑可以被包含在上述溶出液中。進(jìn)行上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)的試劑可以含有DNA聚合酶、dNTP、引物。上述核酸擴(kuò)增反應(yīng)用容器可以具有固定上述管的密封形成部和液滴移動(dòng)的流路形成部。上述密封形成部可以具有收容從上述流路形成部溢出的油的油收容部。還可以具備與上述管的第1塞子側(cè)連通并將上述核酸結(jié)合性固相載體導(dǎo)入上述管中的罐。上述罐與上述管可以介由上述柱塞結(jié)合。?

本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式是一種核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒式試劑盒，具備上述任一種核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒和將上述核酸結(jié)合性固相載體導(dǎo)入上述管的罐。上述罐可以含有提取核酸的溶解液和上述核酸結(jié)合性固相載體。上述罐可以具有開口部，上述開口部可以具有可拆卸的蓋。上述罐的開口部可以按照能夠被安裝于上述管的第1塞子側(cè)的開口部的方式構(gòu)成。?

根據(jù)本發(fā)明，能夠提供一種可簡(jiǎn)便地進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)的核酸擴(kuò)增反應(yīng)用筒。?

附圖說明

圖1：圖1A和圖1B是筒1的說明圖。?

圖2：圖2A～圖2C是筒1的動(dòng)作說明圖。?

圖3：圖3A～圖3D是罐3的說明圖。?

圖4：圖4是固定爪25和導(dǎo)板26與安裝部62的說明圖。?

圖5：圖5A和圖5B是PCR容器30的周邊的說明圖。?

圖6：圖6A是PCR裝置100的內(nèi)部結(jié)構(gòu)的立體圖。圖6B是PCR裝置100的主要結(jié)構(gòu)的側(cè)面圖。?

圖7：圖7是PCR裝置100的框圖。?

圖8：圖8A是旋轉(zhuǎn)體61的說明圖。圖8B是旋轉(zhuǎn)體61的安裝部62中安裝有筒1的狀態(tài)的說明圖。?

圖9：圖9A～圖9D是安裝筒1時(shí)的PCR裝置100的狀態(tài)的說明圖。?

圖10：圖10是使磁鐵71向下方移動(dòng)時(shí)的磁珠7的行為的示意圖。?

圖11:圖11A～圖11C是核酸溶出處理的說明圖。?

圖12：圖12是使磁鐵71搖動(dòng)時(shí)的磁珠7的行為的示意圖。?

圖13：圖13是表示有無磁鐵71搖動(dòng)的表。?

圖14：圖14A～圖14C是液滴形成處理的說明圖。?

圖15：圖15A和圖15B是熱循環(huán)處理的說明圖。?

圖16：圖16是表示在本發(fā)明涉及的一個(gè)實(shí)施例中使用的核酸提取用試劑盒及其組裝后的裝置的圖。?

圖17是表示本發(fā)明涉及的一個(gè)實(shí)施例中的實(shí)時(shí)PCR的結(jié)果的圖。?

具體實(shí)施方式