[發明專利]3,4-苯并芘酶聯免疫檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201410088941.5
• 申請日: 2014-03-11
• 公開（公告）號: CN103852581A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 席俊;史巧巧;高學梅;閆慧麗;陸啟玉
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一、技術領域：

本發明涉及一種試劑盒，尤其是涉及一種3,4-苯并芘酶聯免疫檢測試劑盒。

二、技術背景：

苯并芘在環境中存在廣泛，并且是世界公認的三大致癌物質之一，在工業上無生產和使用價值，一般只作為生產過程中形成的副產物隨廢氣排放。最早于1933年，英國科學家J.W.Cook等人從瀝青中分離得到苯并芘純品，合成證明了其化學結構，并進行動物實驗，誘導小鼠產生了皮膚癌，由此，苯并芘被確認為是第一個化學環境致癌物。之后，研究人員對動物采用口服、靜脈注射、吸入、氣管滴注等方式給藥，證明苯并芘還可引發肺癌、胃癌、膀胱癌及消化道癌等多種癌癥。近年來，苯并芘所造成的食品安全問題越來越嚴重，根據國家《GB2716-2005食用植物油衛生標準》，食用油中苯并芘含量的最高上限為10μg/kg，而國家質檢總局此前關于湖南省金浩茶油的抽檢結果顯示，苯并芘含量已達到60μg/kg，是規定上限的6倍，因此，充分認識3,4-苯并芘的性質，研究出快速方便的檢測方法、建立有效的監控體系和控制標準是十分必要的。

目前，3,4-苯并芘殘留的檢測方法主要有熒光分光光度法、高效液相色譜法（HPLC）、聯用技術等。但這些方法所用儀器昂貴，樣品前處理復雜，檢測時間長，檢測費用高，需要熟練的技術人員進行操作，大大限制了其廣泛應用。因此研制特異、敏感、快速、簡便的3,4-苯并芘檢測方法具有十分重要的意義。

三、發明內容：

本發明的目的：提供一種檢測方便快捷、成本低、靈敏度高、特異性好的檢測工具，此種檢測工具不需要專業人員操作，可快速準確檢測樣品的3,4-苯并芘含量，彌補了色譜檢測技術的不足。

本發明的技術方案：3,4-苯并芘酶聯免疫快速檢測試劑盒，包括盒體、17個試劑瓶、1塊酶標板，其中，塑料泡沫板設置在盒體內，塑料泡沫板上設有多個試劑瓶凹槽，多個試劑瓶下凹槽的高度是所對應的試劑瓶高度的1/3-3/4，各組試劑瓶放置在多個試劑瓶下的凹槽內。

上述一種3,4-苯并芘酶聯免疫快速檢測試劑盒，包括盒體，17個試劑瓶，一塊酶標板，一塊蓋模板，一個自封袋，一個放試劑瓶的下凹槽，一份說明書，一份質檢報告。

其特征在于：96孔酶標板，上面包被有羊抗鼠二抗，可拆卸成12條酶標微孔條，可以一次測試多個樣品，也可以拆開分次測試，剩余的酶標微孔條可以儲存在自封袋內，下次使用；所述的試劑瓶分為八組：第一組試劑瓶是裝有標準溶液的試劑瓶，共9瓶，第二組是裝有高濃度標準品溶液的試劑瓶，共1瓶；第三組試劑瓶是裝有酶標3,4-苯并芘濃縮液的試劑瓶，共1瓶；第四組試劑瓶為裝有3,4-苯并芘單克隆抗體濃縮液的試劑瓶，共1瓶，第五組試劑瓶是分別裝有顯色液A液和B液的試劑瓶，分別各1瓶，共2瓶；第六組試劑瓶是裝有終止液的試劑瓶，共1瓶；第七組試劑瓶是裝有樣品稀釋液的試劑瓶，共1瓶；第八組試劑瓶是裝有濃縮洗滌液試劑瓶，共1瓶。用不同顏色的瓶蓋和瓶體對試劑進一步加以區分。

上述的一種3,4-苯并芘酶聯免疫快速檢測試劑盒，其中八組試劑瓶分別為：標準品溶液和高濃度標準品溶液均用黑色帽的棕色玻璃瓶，酶標3,4-苯并芘濃縮液用紅色帽的白色PE塑料瓶，3,4-苯并芘單克隆抗體濃縮溶液用黑色帽的黑色PE塑料瓶，顯色液A液用白色帽的黑色塑料瓶，顯色液B液用紅色帽的黑色PE塑料瓶，終止液用黃色帽的白色PE塑料瓶，凝縮洗滌液用透明帽的白色PE塑料瓶，樣品稀釋液用紅色帽的白色PE塑料瓶。下凹瓶位由白色塑料泡沫制成。

根據權利要求1所述的一種3,4-苯并芘酶聯免疫分析試劑盒，其特征在于，所述的盒體為硬質盒體。

上述的3,4-苯并芘酶聯免疫分析試劑盒，其中，所述的多個試劑瓶下凹槽的大小與所對應的試劑瓶大小相匹配。

試劑瓶放在塑料泡沫凹槽內，和說明書、質檢報告、蓋模板、酶標板、自封袋一起封裝在硬質盒內，便于攜帶和運輸。

測試時，采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被羊抗鼠二抗，與工作濃度的3,4-苯并芘單克隆抗體結合之后，樣本中含有的3,4-苯并芘和酶標3,4-苯并芘抗原共同競爭3,4-苯并芘單克隆抗體上的有限位點，反應達到平衡后用底物顯色，樣本吸光度與標準曲線比較對應的值，反對數后再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中3,4-苯并芘的含量。