[發明專利]一種參芪芝藥性菌質液體發酵方法

有效

• 申請號: 201410088715.7
• 申請日: 2014-03-11
• 公開（公告）號: CN103911294A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 宋鳳瑞;蘇玲;陳維佳;皮子鳳;邢俊鵬;劉志強
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 長春菁華專利商標代理事務所 22210
• 代理人: 陶尊新

技術領域

本發明屬于中藥微生物發酵領域，具體涉及一種參芪芝藥性菌質液體發酵方法。

背景技術

人參、黃芪均是臨床治療中常用的補氣藥，但是，在藥性、藥效上二者存在差別。人參味甘微苦而性平，補氣兼養陰，守而不走。黃芪味甘性溫，補氣兼扶陽，走而不守。將兩者配對，參芪一守一走，陰陽兼顧，徹里徹外通補無瀉，可用于一切氣虛不足之癥，具有強大的補氣助元作用。藥用真菌靈芝是具有滋補強壯、扶正固本的傳統名貴藥材，現代藥理學研究證實，靈芝對于改善記憶力，促進睡眠，增強人體免疫力，輔助腫瘤放化療，保肝護肝等方面均具有顯著療效。

中藥雙向發酵技術是以將藥用真菌接種在中藥基質上，發酵生產藥用真菌的同時，產生的酶可催化中藥的化學成分發生轉化，提高或降低中藥化學成分的的含量或產生新化合物，使發酵得到的藥性菌質的生物活性、毒性發生改變，或具備新的活性。由于液體發酵較固體發酵所需時間短、生產量大、產品質量穩定、生產過程易于監控、工廠化產業化程度高，因此將雙向發酵技術應用于液體發酵生產中具有更大的經濟及社會效益。目前已報道的液體雙向發酵的文獻較少，其中中國專利200910218080.7公開了一種利用靈芝發酵紅參水煎液的最佳工藝條件和其發酵產物的抗疲勞活性。目前尚未有任何文獻公開以靈芝為發酵菌種，發酵以人參-黃芪2種中藥組合的復配型發酵基質的雙向液體發酵工藝及其藥性菌質抗氧化方面的應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種參芪芝藥性菌質液體發酵方法，該方法時間短，且得到的參芪芝菌質具有較高的抗氧化活性。

本發明提供一種參芪芝藥性菌質液體發酵方法，該方法包括：

將保存于PDA固體培養基中的靈芝菌種按3mm×3mm，接種至中藥人參、黃芪水提液為基質的液體發酵培養基中，每瓶2塊，在溫度為22～30℃、轉速為100～180r/min條件下培養10d～20d，得到參芪芝藥性菌質；

所述液體發酵培養基按如下方法配制：將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，分別稱取人參20～60g、黃芪6～90g，兩者混勻，300～500ml蒸餾水加熱回流提取2～3次，每次0.5h，合并水提液定容至1L，pH自然，分裝于250ml三角瓶中，每瓶裝液量50ml，封口，115～121℃滅菌20～30min。

優選的是，所述的靈芝菌種包括赤芝和寒芝。

優選的是，所述的靈芝菌種為赤芝時，液體發酵培養基中，取人參30g，黃芪10g。

優選的是，所述的靈芝菌種為赤芝時，發酵溫度為24～26℃，轉速為120～160r/min。

優選的是，所述的靈芝菌種為赤芝時，發酵時間為15d～17d。

優選的是，所述的靈芝菌種為寒芝時，液體發酵培養基中，取人參30g，黃芪15g。

優選的是，所述的靈芝菌種為寒芝時，發酵溫度為26～28℃，轉速為120～160r/min。

優選的是，所述的靈芝菌種為寒芝時，發酵時間為15d。

本發明的有益效果

本發明提供一種參芪芝藥性菌質液體發酵方法，本發明使用的液體發酵培養基為人參、黃芪復配中藥水提液，無其他化學成分添加，安全無害；將人參與黃芪的組合將彌補各自藥性、藥效的不足，擴大適應癥的范圍，并且在靈芝的發酵下，獲得的藥性菌質中同時具有人參、黃芪、靈芝的活性成分，實現3味傳統中藥的有效配伍，藥理藥性平衡，提升原藥材的生物活性。將所得發酵液及菌絲體進行分離，發酵液凍干后甲醇溶液超聲提取；菌絲體干燥后粉碎，70%乙醇超聲提取，分別以發酵液提取物及菌絲體提取物清除超氧陰離子自由基及羥基自由基，結果顯示10mg/ml時，赤芝發酵液對超氧陰離子和羥基自由基的清除率為不低于70%及50%；赤芝菌絲體對超氧陰離子和羥基自由基的清除率均不低于30%；寒芝發酵液對超氧陰離子和羥基自由基的清除率不低于及45%及50%；寒芝菌絲體對超氧陰離子和羥基自由基的清除率不低于50%及10%，可見本發明方法制得的參芪芝藥性菌質具有較強的抗氧化活性。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細的描述。

對比例1