[發明專利]一種纖維蛋白原的檢測方法

有效

• 申請號: 201410085911.9
• 申請日: 2014-03-10
• 公開（公告）號: CN104914253B
• 公開（公告）日: 2017-03-22
• 發明（設計）人: 魏明明;邱笑違;陳永強
• 申請（專利權）人: 北京樂普醫療科技有限責任公司
• 主分類號: G01N33/86
• 分類號: G01N33/86
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司11002
• 代理人: 王闖

技術領域

本發明涉及凝血功能檢驗技術領域，尤其涉及一種用于血栓彈力圖儀檢測纖維蛋白原的方法。

背景技術

血栓彈力圖于1948年由德國人Harter發明。80年代開始廣泛用于臨床指導術中輸血取得了良好效果，現已成為當今檢測凝血功能的最重要指標。利用血栓彈力圖對凝血功能檢測時，需要使用血栓彈力圖儀，血栓彈力圖儀可對一份血樣進行完整地監測，包括從凝血開始至血凝塊形成及纖維蛋白溶解的全過程，可對凝血因子、纖維蛋白原、血小板聚集功能以及纖維蛋白溶解等方面進行凝血全貌的檢測和評估。血栓彈力圖儀檢測血凝塊的物理特性基于以下原理：將一特制靜止且盛有血樣的圓柱形杯以4°45′的角度旋轉，每次轉動持續10秒。通過一根螺旋絲懸掛且浸泡在血樣中的針來檢測血樣的運動。纖維蛋白與血小板組成的復合物將杯和針粘在一起后，杯旋轉所產生的旋轉力傳遞至血樣中的針。纖維蛋白與血小板組成的復合物的強度能影響針運動的幅度，以致血凝塊能使針的運動與杯的運動同步進行。因此，針的運動幅度與已形成的血凝塊的強度有直接關系。當血凝塊回縮或溶解時，針與血凝塊的聯結解除，杯的運動不再傳遞給針。針的旋轉被傳感器轉換成電子信號，這一電子信號通過計算機轉化測得血栓彈力圖。

目前，在利用血栓彈力圖儀對血樣中的纖維蛋白原功能檢測時，傳統做法：第一步，配制纖維蛋白原的激活試劑；第二步，將配制的纖維蛋白原激活試劑制備成凍干粉，凍干粉盛裝在西林瓶中；第三步，檢測時，需要稱量出一定量的纖維蛋白原激活試劑的凍干粉；第四步，經計算加入定量的蒸餾水對凍干試劑進行復溶；第五步，取定量的復溶后的纖維蛋白原激活試劑加入在血樣中；第六步，通過血栓彈力圖儀進行檢測，借助全血的動態凝固過程監測纖維蛋白網，從而定量計算出患者的纖維蛋白原的強度。

此種傳統檢測方法在對纖維蛋白原功能檢測時,在血樣檢測過程中會伴隨血小板形態和功能的變化，因血小板在檢測中受到溫度、血樣儲存時間、臨床藥物、實驗操作等因素的影響，血小板會提前激活，導致在進行纖維蛋白原功能檢測時，檢測振幅會包含血小板因素，臨床纖維蛋白原振幅超過實際振幅，影響實驗結果的準確性和穩定性，在臨床檢測中會出現纖維蛋白原假陽性結果，給臨床造成誤判，指導患者藥物治療效果不佳；臨床檢測時，步驟繁瑣，需要稱量、計算、復溶、多次加樣等繁瑣操作，容易造成誤差，導致纖維蛋白原激活試劑的穩定性差，測試結果不夠準確；此種方法凍干的纖維蛋白原激活試劑為固體粉末狀，在使用和運輸過程中容易接觸空氣中的水分和養分導致試劑失效，造成不必要的浪費。

因此，針對以上不足，需要一種臨床操作簡單，測量結果準確性高的纖維蛋白原的檢測方法。

發明內容

（一）要解決的技術問題

本發明要解決的技術問題是提供了一種纖維蛋白原的檢測方法，使臨床檢驗時操作方便，檢測結果準確性高。

（二）技術方案

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種纖維蛋白原的檢測方法，包括如下步驟：

S1、在纖維蛋白原基礎試劑中依次加入固相試劑和血小板抑制劑，形成纖維蛋白原激活試劑；

S2、將纖維蛋白原激活試劑定量分裝在樣品杯中，并將分裝后的樣品杯置于西林瓶內；

S3、對S2中西林瓶進行凍干，將纖維蛋白原激活試劑粘附在樣品杯底；

S4、將S3中凍干后的西林瓶在真空條件下做壓蓋密封操作，使樣品杯處于真空環境；

S5、在肝素抗凝環境下采集全血樣本；

S6、將樣品杯從西林瓶中取出，置于血栓彈力圖儀的杯槽中；

S7、通過加樣槍將采集后的全血樣本加入樣品杯內；

S8、啟動血栓彈力圖儀對全血樣本做纖維蛋白原功能檢測。

其中，在步驟S1中的固相試劑在纖維蛋白原激活試劑的濃度為1-10g/L。

其中，固相試劑包括蔗糖、海藻糖、乳糖、麥芽糖、葡萄糖、聚乙二醇和甘油中的之一或其混合。

其中，在步驟S1中的血小板抑制劑在纖維蛋白原激活試劑中的濃度為0.1-10U/mL。

其中，血小板抑制劑包括阿西單抗、埃替非巴肽和替羅非班中的之一或其混合。

其中，在步驟S1中的纖維蛋白原基礎試劑包括緩沖劑、蛋白保護劑、鹽類物質、氨基酸、表面活性劑、防腐劑和纖維蛋白原交聯劑的混合溶液。

其中，在步驟S2的樣品杯中加入的纖維蛋白原激活試劑的體積為10-50ul。