[發明專利]一種叢枝菌根真菌誘導黃瓜抗旱的方法

在審

• 申請號: 201410083659.8
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103798052A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 許亞峰;袁力;汪浩然;陳艷花;徐華超;謝淮北
• 申請（專利權）人: 安徽理工大學
• 主分類號: A01G1/00
• 分類號: A01G1/00;A01G31/00;A01C1/02;A01C21/00
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技術領域

本發明涉及一種誘導抗性的方法，尤其涉及一種叢枝菌根真菌誘導黃瓜抗旱的方法。

背景技術

叢枝菌根(Arbuscularmycorrhiza，AM)是土壤中的菌根真菌與高等植物的根系形成的一種聯合體，是廣泛存在于自然界中一種普遍的植物共生現象。大量研究發現，菌根能夠促進植物生長，增強植物的抗逆性，提高植物的水分和養分的吸收能力以及改良土壤等能力。目前，退化生態系統的恢復重建備受國內外的關注，成為現代生態學領域研究熱點之一。AM接種技術為菌根化育苗造林，為有效解決退化生態系統植被恢復開辟了一條重要途徑。利用菌根技術來改善石山區適生造林樹種的抗旱及耐旱性研究，仍鮮見報道。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：本發明提供一種叢枝菌根真菌誘導黃瓜抗旱的方法，其步驟是：

（1）將初始叢枝菌根真菌菌劑單獨接種擴繁，擴繁后的叢枝菌根的繁殖體孢子密度>30個/克干土，初始叢枝菌根真菌菌劑是指摩西球囊霉GM(BGCNM01A、BGCHEB07B，約300孢子/20g)，地表球囊霉GV(BGCGD01C，約1000個孢子/20g)，根內球囊霉GI(BGCBJ09)，兩次混合接種所用的叢枝菌根真菌菌劑為上述三種真菌分別擴繁后混制而成，混制比例按0.5～1:1:1，以重量比計；

（2）叢枝菌根真菌菌劑菌根化黃瓜苗的培養：接種介質采用Hoagland營養液與珍珠巖的混合物，等量稱取GM(BGCNM01A，BGCHEB07B)，GV，GI菌種各20g，混合均勻，將混合菌種與無菌珍珠巖以1∶1的比例混合，在泡沫漂浮孔穴育苗盤中加入擴繁后的所述混合叢枝菌根真菌菌劑18g～25g，育苗盤每個空穴播種黃瓜種子2粒，使育苗盤下半部分浸入自來水中，待種子出苗后30天間苗，每孔留苗1棵，并把自來水更換成1/2～1/5強度的霍格蘭(Hoagland)營養液，根據水位高度每天補足減少的水分，每2～3周更換一次營養液；生長55～65天取苗，當根系菌根侵染率大于30%時即可用于移栽；

（3）抗旱誘導：待幼苗生長3個月后，將幼苗移入規格為25cm×25cm的黑色育苗袋中，各裝入滅菌土壤3.0kg，每盆施全磷80mg/kg、全氮100mg/kg，中度干旱保持土壤相對含水量在田間持水量的40%左右；處理前充分澆水，任其自然干旱，當自然干旱到各處理設定相對含水量時進行控水處理，控水期間運用稱重補水法保持同處理各重復的土壤含水量維持在試驗要求范圍，含水量調節時間定為每天早上8:00進行，補給前一天缺失的水分；

（4）指標測定：當黃瓜幼苗生長9個月后，進行生長指標測定，然后采用酸性品紅染色，通過感染長度確定菌根侵染情況，并測定生物量及N、P元素含量，生長測定：在開始控水處理后每隔8天測定苗高和地徑，直至干旱脅迫試驗結束，生物量測定:在脅迫試驗結束后，將不同處理的植株沖洗干凈，然后分根莖葉柄置于牛皮紙袋中，放入105℃的烘箱中殺青20min后，維持在85℃烘干至恒重，稱量其干質量；植物N、P測定:全氮采用濃硫酸－高氯酸消煮，用凱氏定氮儀測定;全磷采用硝酸－高氯酸消煮，用鉬銻抗比色法測定；菌根依賴性(%)=(接種處理干質量－不接種處理干質量)/接種干質量×100%。

所述初始叢枝菌根真菌菌劑擴繁：將河沙和土壤按3：1混合，以三葉草或玉米為宿主植物；把河沙土壤混合物過1mm篩，121℃水蒸汽滅菌或160～170℃干熱滅菌2h，加入0.005～0.01%尿素和0.02～0.04%過磷酸鈣，接種3%～5%初始叢枝菌根真菌菌劑，用層施法或混施法拌勻，然后加入18%～22%水，播種所述宿主植物的種子，常規管理3～4個月后即可收獲。

所述收獲的方法是把所述宿主植物的地上部剪去，剪碎根段混勻，含有所述宿主植物根段、叢枝菌根真菌孢子、根外菌絲的風干基質即可用做叢枝菌根真菌菌劑。

在干旱脅迫條件下，接種AM真菌促進了黃瓜幼苗的生長，增加了黃瓜幼苗地上部分和地下部分的生物量。雖然從根冠比和菌根依賴性來看，黃瓜幼苗對AM真菌是弱依賴性或無依賴性，菌根化苗與對照無明顯差異，但在中度干旱脅迫時，菌根化苗全株干質量增幅最大，比對照增加33.36%。初步認為，接種AM真菌在一定程度上可提高抗旱能力。