[發明專利]一種基于光纖倏逝波生物傳感器檢測單核細胞增生李斯特氏菌的方法

無效

• 申請號: 201410082140.8
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103901210A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 劉金華;劉韜;孟日增;聶丹丹;劉陽;王韋琳
• 申請（專利權）人: 吉林出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/64
• 代理公司: 長春市東師專利事務所 22202
• 代理人: 張鐵生

1.一種基于光纖倏逝波生物傳感器檢測單增李斯特氏菌的方法，它包括：

1）CdTe量子點與單增李斯特氏菌多克隆抗體的偶聯

取水溶性CdTe量子點與PBS緩沖液混合，單增李斯特氏菌多克隆抗體加入到上述混合液中，然后將加入新制備的EDC溶液，將混合樣品在37℃培養箱中避光反應2個小時，然后4℃過夜，將反應混合液離心，上清液用超濾膜反復進行超濾，去除小分子物質和未反應的CdTe量子點，收集超濾膜截留的?CdTe-多克隆抗體偶聯物；

2）捕獲抗體光纖探針的制備

將聚苯乙烯光纖表面，先用鹽酸和乙醇混合液清洗，再用硫酸清洗，接下來在超純水中煮沸，使光纖表面具有親水的極化層；然后將處理好的光纖放入單增李斯特氏菌單抗的溶液中浸泡，取出用去離子水洗凈，即得到包被有捕獲抗體光纖探針；

3）單增李斯特氏菌的檢測

將CdTe-多克隆抗體偶聯物制成水溶液，將捕獲抗體光纖探針插入待測溶液中，然后再將捕獲抗體光纖探針放入CdTe-多克隆抗體偶聯物制成水溶液中，用光纖倏逝波生物傳感器檢測。

2.根據權利要求1所述的一種基于光纖倏逝波生物傳感器檢測單增李斯特氏菌的方法，其特征在于：步驟1）所述的混合樣品，包含1.0mL量子點，1.0mL?PBS，400uL抗體，100uL?EDC。

3.根據權利要求2所述的一種基于光纖倏逝波生物傳感器檢測單增李斯特氏菌的方法，其特征在于：步驟2）所述的光纖為聚苯乙烯光纖。

4.根據權利要求3所述的一種基于光纖倏逝波生物傳感器檢測單增李斯特氏菌的方法，其特征在于：步驟2）所述的單抗的溶液為15?μg/ml。

5.根據權利要求4所述的一種基于光纖倏逝波生物傳感器檢測單增李斯特氏菌的方法，其特征在于：步驟3）所述的CdTe-多克隆抗體偶聯物制成水溶液為100?μg/ml檢測多克隆抗體。