[發(fā)明專利]中華鱘等滲鹽度點(diǎn)的實(shí)驗及計算方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410081824.6
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103808915A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李偉;危起偉;李創(chuàng)舉;劉志剛
• 申請（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48
• 代理公司: 荊州市技經(jīng)專利事務(wù)所 42219
• 代理人: 韓志剛

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明屬水產(chǎn)科學(xué)領(lǐng)域，特別涉及到中華鱘的等滲鹽度點(diǎn)的研究。

背景技術(shù)

????全世界現(xiàn)存27種鱘魚中有16種屬于廣鹽性魚類，即在淡水和咸水中均能生存，包括中華鱘。中華鱘屬于國家一級保護(hù)動物，瀕危等級為極危，為保護(hù)這一物種國家投入了大量的人財物力。等滲點(diǎn)鹽度，是指魚體生長的一定鹽度的環(huán)境水體滲透壓等于魚自身滲透壓。在等滲環(huán)境下，魚類不用在滲透壓調(diào)節(jié)方面消耗能量，同時等滲鹽度對血液電解質(zhì)組成有顯著影響。因此，找到中華鱘等滲點(diǎn)格外重要。另外，滲透壓和年齡相關(guān)性顯著，隨年齡變化滲透壓顯著變化。故找到中華鱘各年齡段的等滲點(diǎn)鹽度或者等滲點(diǎn)鹽度關(guān)于年齡的變化方程對物種保護(hù)意義重大。

?????現(xiàn)有關(guān)于等滲點(diǎn)求法的實(shí)驗的描述，具體是將實(shí)驗對象養(yǎng)殖在4-5個不同的梯度鹽度下，由于實(shí)驗對象對新的鹽度環(huán)境的應(yīng)激，需要使實(shí)驗對象適應(yīng)新環(huán)境，消除應(yīng)激，從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗數(shù)據(jù)。在等到實(shí)驗對象適應(yīng)新的環(huán)境后，進(jìn)入長期養(yǎng)殖階段，該階段一般持續(xù)10-20天，期間保證實(shí)驗對象行為和攝食均正常。然后抽取血液，制備血清。待血清穩(wěn)定后，測定各鹽度下制備的實(shí)驗對象血清和環(huán)境滲透壓，用鹽度或者環(huán)境滲透壓（X軸）建立血清滲透壓（Y軸）的函數(shù)關(guān)系式，再令Y=X，即得出等滲滲透壓，相應(yīng)的鹽度即為等滲鹽度?（Sampaio，2002）。考慮到實(shí)驗樣本數(shù)需求（5-30），以及過程操作（各個梯度鹽度環(huán)境的設(shè)置、空間的麻醉、采血）。該方法一般需要建立以下條件：1.?各個梯度鹽度環(huán)境的設(shè)置，需要有足夠多的海水或者海水素進(jìn)行稀釋；或者價格昂貴的維生系統(tǒng)保證鹽度環(huán)境的質(zhì)量；2.?需要額外建立較大的實(shí)驗場所和空間，特別對于像中華鱘這樣的大型魚類，體長達(dá)到2?m以上后，難有理想的實(shí)驗系統(tǒng)滿足其生長環(huán)境；因此，用該方法很難完實(shí)現(xiàn)中華鱘各年齡段的鹽度實(shí)驗。而特別對于成年中華鱘而言，目前遷地保護(hù)下養(yǎng)殖在淡水水體，如經(jīng)同樣的方法來計算等滲點(diǎn)，不僅面臨以上困難，還面臨著樣本數(shù)量不足的問題。如果僅以淡水一個鹽度作為實(shí)驗組，那么就可以節(jié)約使用3-4組實(shí)驗對象。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種中華鱘等滲鹽度點(diǎn)的實(shí)驗及計算方法，該方法不僅適用于小型中華鱘，也適用于于成年中華鱘，且該方法簡單易行，克服了設(shè)立多梯度鹽度組、實(shí)驗系統(tǒng)難實(shí)現(xiàn)，難操作，樣本數(shù)少等實(shí)驗問題，為揭示各齡中華鱘的等滲鹽度點(diǎn)提供了較好的方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

中華鱘等滲鹽度點(diǎn)的實(shí)驗及計算方法，其特征在于：該方法步驟如下：

1.?????將中華鱘血液，制備血清，備用；

2.?????測定6-15份同齡但不同個體的中華鱘血清的滲透壓值，并利用統(tǒng)計軟件SASV8計算血清滲透壓均值，制成表格。

3.?????將淡水中血清滲透壓轉(zhuǎn)化為等滲點(diǎn)鹽度條件下的血清滲透壓，即血清滲透壓均值即為環(huán)境滲透壓“Yw”。

4.?????將各年齡段中華鱘血清均滲透壓均值帶入下列公式式：Yw=8.45293+26.6572x???，其中“Yw”表示環(huán)境滲透壓，“x”表示鹽度，以血清滲透壓為Y_w賦值，即可計算出中華鱘的等滲點(diǎn)x。

本發(fā)明的積極效果為：

1.????本發(fā)明證明了在中華鱘在淡水滲透壓等于等滲環(huán)境的滲透壓，為求中華鱘等滲鹽度點(diǎn)提供了捷徑。

2.????本發(fā)明克服了設(shè)立多梯度鹽度組、較大的實(shí)驗場地和空間等實(shí)驗等問題，同時無需購買特別的維生系統(tǒng)和實(shí)驗設(shè)備，極大地節(jié)約了資金和人力支出。只需在淡水中進(jìn)行適應(yīng)養(yǎng)殖，而目前中華鱘子一代后代均在淡水中養(yǎng)殖，為實(shí)驗提供了極大的便利。

3.????緩解了實(shí)驗樣本少的問題。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

實(shí)施例一?

12齡中華鱘等滲點(diǎn)的實(shí)驗及計算方法

1、??????????12齡中華鱘血清的制備

將11份12齡中華鱘血液各1ml，靜置2小時后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘，得上清液即制得血清。

2、血清滲透壓的測定

血清滲透壓經(jīng)由冰點(diǎn)滲透壓儀測定，取20μL血清于Advanced?210微量樣品滲透壓管，探針測得冰點(diǎn)值，然后轉(zhuǎn)化滲透壓值。滲透壓值見表1。

表1?淡水環(huán)境中12齡中華鱘血清滲透壓