[發明專利]新磷氮霉素A在抑制煙草炭疽病菌中的應用在審
| 申請號: | 201410081348.8 | 申請日: | 2014-03-07 |
| 公開(公告)號: | CN103828837A | 公開(公告)日: | 2014-06-04 |
| 發明(設計)人: | 胡志明;李永亮;郭應成;姜吉飛;梁梅;楊佩文;尚慧;段艷萍;肖志新;李家瑞 | 申請(專利權)人: | 云南省農業科學院農業環境資源研究所;云南省煙草公司保山市公司 |
| 主分類號: | A01N57/16 | 分類號: | A01N57/16;A01P3/00 |
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| 地址: | 650205 云南*** | 國省代碼: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 新磷氮 霉素 抑制 煙草 炭疽 病菌 中的 應用 | ||
技術領域
本發明屬于煙草病蟲防治技術領域,涉及新磷氮霉素A在抑制煙草炭疽病菌中的應用。
背景技術
近年來,從微生物中分離生物活性物質成為眾多新農藥開發工作者的熱點之一,目前,廣泛應用的抗生素約70%是來自于放線菌所產生,具有分布廣泛、抑菌譜較廣、篩選方法多樣等特點,其研究與開發具有十分重要的科學價值和實用價值。新磷氮霉素A來自于公牛鏈霉菌(Streptomyces?tauricus)發酵產物的一種全新抗作物真菌病害的農用抗生素新化合物,其低毒、對人畜安全,具有較好的開發前景。本研究發明是在實驗的基礎上,采用菌絲生長速率法,測定了新磷氮霉素A在不同質量濃度下對煙草炭疽病的相對抑制率,并對其進行了室內毒力測定的回歸分析,為該新抗生素的一個新用途提供了配置新殺菌劑的理論依據。
發明內容
本發明的目的在于提供了新磷氮霉素A對煙草炭疽病菌產生抑制性的用途。
本發明的特點還在于新磷氮霉素A的分子式為C31H5lN2Ol0P,分子量為642.72道爾頓Diaton。新磷氮霉素A是公牛鏈霉菌(Streptomyces?tauricus)發酵產物。
新磷氮霉素A為發明者在新農藥創制項目的研究工作中,利用云南省的放線菌資源,通過高通量(每年幾萬份的樣點篩選)的初篩、復篩和深入篩選,并試驗,得到的一個具有新穎結構的化合物。經過TLC、HPLC、IR、UV、13C?NMR、1H?NMR、31P?NMR、HLQC和HMBC等大量的結構解析試驗和研究,確定了新磷氮霉素A的分子式為C31H51N2Ol0P,分子量為642.72。該化合物的分子式、分子量、以及在C-4、C-8、C-9、C-11、C-19和C-20的取代基與磷氮霉素類(Phoslactomycins)化合物有明顯的差異,屬于具有磷酸基及銨鹽的吡喃酮類的新化合物。在室內篩選試驗中我們首次發現了對煙草炭疽病具有明顯的殺菌活性,遂開展了煙草對炭疽病菌的毒理學研究,各種重復試驗表明:新磷氮霉素A對煙草炭疽病菌菌絲生長的抑制作用強,最總獲得的EC50為64.92mg/L,說明煙草炭疽病菌對新磷氮霉素A的敏感性強。新磷氮霉素A作為云南省分離得到的放線菌所產生的次生代謝產物,原料易得,可以作為活性物質進行今后殺煙草炭疽病的新農藥的核心化合物。因此需要申請該化合物針對煙草炭疽病的保護。目前,針對煙草炭疽病菌的防治的方法多為化學合成的藥劑較多,本發明采用來自于公牛鏈霉菌(Streptomyces?tauricus)發酵產物的一種全新抗作物真菌病害的化合物一新磷氮霉素A,對煙草炭疽病菌進行了室內毒力測定,結果發現新磷氮霉素A對煙草炭疽病菌菌絲生長的抑制作用最強,并且煙草炭疽病菌對新磷氮霉素A的敏感性較強。
本發明的有益之處在于新磷氮霉素A作為放線菌的次生代謝產物,其毒性低、發酵得率較高、原料易得,對煙草炭疽病菌菌絲生長的抑制作用強,可重點針對煙草炭疽病為主的靶標真菌病害開展新的發明研究和研制制劑的應用探索。
具體實施方式
應用以下實施例說明新磷氮霉素A在抑制煙草炭疽病菌中的應用:
實施例1:新磷氮霉素A對煙草炭疽病菌的毒力測定:
采用菌絲生長速率法測定新磷氮霉素A對煙草炭疽病菌的菌絲抑制效果。以預試驗為基礎,確定新磷氮霉素A與水的濃度為400、200、100、60、20mg/L5個梯度。稱取0.2g原藥溶于20mL無菌水配成10000mg/L的母液,再將其由高到低配成5個梯度質量濃度(40000、20000、10000、6000、2000mg/L),以無菌蒸餾水作對照。分別取1mL藥劑加入已滅菌的含有100mL的PSA培養基的三角瓶中,充分搖勻,分別等量倒入5個直徑相同的培養皿中,制成帶藥平板,三次重復。將直徑為7mm事先活化并用打孔器處理過的菌餅接入平板中央,菌絲面朝下,置于25℃培養箱中培養。采用十字交叉法測定病原菌菌落直徑及相對抑制率,根據毒力回歸方程的EC50值分析新磷氮霉素A對病原菌的毒力大小。相對抑制率公式如下:
相對抑制率(%)=(對照菌落平均直徑一處理菌落平均直徑)/對照菌落平均直徑×100。
新磷氮霉素A對煙草炭疽病菌的測定結果:
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