[發明專利]用于垃圾除臭的復合微生物制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201410080203.6
• 申請日: 2014-03-06
• 公開（公告）號: CN103865847A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 周卓興;陳雪鳳;林金燕
• 申請（專利權）人: 深圳市三林生物科技工程有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/18;B09B3/00;C05F17/00;C05F9/04;B01D53/84;A23K1/16;C02F3/34;C02F11/02;C12R1/865;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/225;C1
• 代理公司: 廣東國欣律師事務所 44221
• 代理人: 姜勝攀

1.一種用于垃圾除臭的復合微生物制劑，其特征在于，該制劑為發酵型酸味，pH值為3.4~4.0，有效活菌總數≥1.0×10^9?CFU/mL，其中，該有效活菌包括釀酒酵母菌10⁵~10^7?CFU/mL、枯草芽孢桿菌10⁶~10^8?CFU/mL、凝結芽孢桿菌10⁶~10^8?CFU/mL、發酵乳桿菌10⁶~10^8?CFU/mL、布氏乳桿菌10⁶~10^8?CFU/mL、屎腸球菌10⁵~10^7?CFU/mL和白色鏈霉菌10⁴~10^6?CFU/mL。

2.一種如權利要求1所述的用于垃圾除臭的復合微生物制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）平板培養：采用劃線接種法將釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌、凝結芽孢桿菌、發酵乳桿菌、布氏乳桿菌、屎腸球菌和白色鏈霉菌的菌株分別接種于固體活化培養基平板上，于30℃~35℃培養36~48小時，使其復壯，形成單菌落；

步驟（1）中的固體活化培養基按照下述重量百分比配制：麥芽提取粉0.3%，牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.3%，KH₂PO₄?0.05%，K₂HPO₄?0.2%，蔗糖1%，MgSO₄·7H₂O?0.025%，瓊脂1.8?%，其余為水，pH值為6.2~6.8，121℃滅菌20分鐘，冷卻備用；

（2）搖瓶種子制作：用接種環將步驟（1）活化的長勢良好無污染的菌種分別接種到液體活化培養基中，以500mL三角瓶30℃~35℃、150~200?rpm條件下振蕩培養36~48小時，得到搖瓶種子液；

步驟（2）中的液體活化培養基按照下述重量百分比配制：麥芽提取粉0.3%，牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.3%，KH₂PO₄?0.05%，K₂HPO₄?0.2%，蔗糖1%，MgSO₄·7H₂O?0.025%，其余為水，pH值為6.2~6.8，121℃滅菌20分鐘，冷卻備用；

（3）馴化培養：在5?L大三角瓶內加入液體馴化培養基，接入步驟（2）的單菌株進行馴化培養，接種量為2~5%，培養條件為30℃~35℃，150~200?rpm振蕩培養，48~72小時；

步驟（3）中的液體馴化培養基按照下述重量百分比配制：麥芽提取粉0.3%，牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.3%，KH₂PO₄?0.05%，K₂HPO₄?0.2%，蔗糖1%，MgSO₄·7H₂O?0.025%，糖蜜2%，pH值為6.2~6.8，115℃滅菌15分鐘，冷卻備用；

（4）種子罐培養：在300?L帶攪拌裝置的不銹鋼種子罐中加入培養基250?L，該培養基按照下述重量百分比配制：糖蜜10%，蛋白胨0.5%，其余為水，pH值順其自然，75℃滅菌2小時，快速冷卻至35℃后，取步驟（3）中馴化好的液體菌種進行混合接種，使步驟（3）馴化好的液體菌種重量之和與步驟（4）培養基的重量比例為1：10，其中各菌組分的重量占液體菌種重量之和的比例為：釀酒酵母菌5~10%、枯草芽孢桿菌15~25%、凝結芽孢桿菌15~20%、發酵乳桿菌10~15%、布氏乳桿菌10~15%、屎腸球菌15~25%和白色鏈霉菌10~20%，30～35℃發酵72~96小時，每天攪拌0.5~1小時，72小時開始檢測pH值，待pH值降至3.4~4.0時即可，此時有效活菌總數≥2.0×10^8?CFU/mL；

（5）發酵罐培養：在3噸帶攪拌裝置的不銹鋼發酵罐內加入發酵培養基2.25噸，該培養基按照下述重量百分比配制：糖蜜10%，其余為水，pH值順其自然，75℃滅菌2小時，快速冷卻至35℃后，接入步驟（4）培養好的復合種子菌液，各菌組分的重量之和與步驟（5）中糖蜜的重量比例為1：1，30～35℃，72～96小時，每天攪拌0.5~1小時，72小時開始檢測pH，待pH降至3.4～4.0時，即制成了用于垃圾除臭的復合微生物制劑。