[發明專利]一種雙孢蘑菇菌株子實體顏色SCAR-PCR鑒定方法

有效

• 申請號: 201410080081.0
• 申請日: 2014-03-06
• 公開（公告）號: CN103789448A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 蔡志欣;陳美元;廖劍華;李洪榮;郭仲杰;蔡丹鳳;王澤生
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院食用菌研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種雙孢蘑菇菌株子實體顏色SCAR-PCR鑒定方法，其特征在于：利用SCAR分子標記對雙孢蘑菇菌株進行PCR特異擴增，從而鑒定菌株的子實體顏色。

2.根據權利要求1所述的雙孢蘑菇菌株子實體顏色SCAR-PCR鑒定方法，其特征在于：利用特異引物對雙孢蘑菇菌株的基因組DNA進行SCAR-PCR擴增，所述特異引物的核苷酸序列為：

SCAR4-F：5’-CAAGTACTGAAAGTGTACTA-3’，?

SCAR4-R：5’-GAGCCTTTCCATGTGCTCAC-3’。

3.根據權利要求2所述的雙孢蘑菇菌株子實體顏色SCAR-PCR鑒定方法，其特征在于：利用所述特異引物對雙孢蘑菇菌株的基因組DNA進行SCAR-PCR擴增，特異性地擴增出1273bp的產物，其中菌株子實體顏色為棕色的擴增為陽性，菌株子實體顏色為白色的擴增為陰性。

4.根據權利要求2所述的雙孢蘑菇菌株子實體顏色SCAR-PCR鑒定方法，其特征在于：所述SCAR-PCR擴增的條件為：?94℃預變性5min；94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸1min，擴增35個循環；72℃延伸10min，?4℃保存。

5.根據權利要求2所述的雙孢蘑菇菌株子實體顏色SCAR-PCR鑒定方法，其特征在于：所述SCAR-PCR擴增的反應體系為：?模板DNA?30ng，上游引物30ng，下游引物30ng，dNTPs?0.1?mmol/L，MgCl₂?2.5?mmol/L，Taq?DNA聚合酶?1?U，1×PCR緩沖液10μL，用ddH₂O將總體積補至20μL。