[發(fā)明專利]一種金屬螯合肽及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410078823.6 | 申請(qǐng)日: | 2014-03-06 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103936823A | 公開(公告)日: | 2014-07-23 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 汪少蕓;趙立娜;黃順麗;邵彪;洪晶;方衛(wèi)東 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 福州大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C07K5/072 | 分類號(hào): | C07K5/072;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;C12P21/06 |
| 代理公司: | 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡學(xué)俊 |
| 地址: | 350108 福建省福州市*** | 國(guó)省代碼: | 福建;35 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 金屬 螯合肽 及其 制備 方法 | ||
1.一種金屬螯合肽,其特征在于:所述肽的氨基酸序列為:eg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種金屬螯合肽,其特征在于:所述金屬為Ca、Fe或Zn。
3.一種如權(quán)利要求1所述的一種金屬螯合肽的制備方法,其特征在于:以乳清蛋白為原料,采用復(fù)合蛋白酶及風(fēng)味蛋白酶復(fù)配對(duì)其進(jìn)行酶解,分離純化、冷凍干燥得到金屬螯合肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種金屬螯合肽的制備方法,其特征在于:所述的酶解條件為:底物濃度5%,酶解pH為7.0、溫度49℃、酶解時(shí)間為7小時(shí)、酶-底物重量配比為1:25。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種金屬螯合肽的制備方法,其特征在于:所述酶為復(fù)合蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶,兩種酶的重量復(fù)配比為復(fù)合蛋白酶:風(fēng)味蛋白酶=?2:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種金屬螯合肽的制備方法,其特征在于:所述分離純化的具體步驟為:酶解產(chǎn)物首先利用TOYOPEARL?DEAE-650M陰離子交換色譜進(jìn)行分離,洗脫液為濃度梯度為含有0-0.5?M?NaCl的0.02?mol/L?pH?9.0的磷酸緩沖液,流速為0.5?mL/min,洗脫峰在214?nm下進(jìn)行測(cè)量;收集具有最高金屬螯合活性的峰,再用Sephadex?G-25凝膠過濾色譜進(jìn)行分離,洗脫液為去離子水,流速為0.3?mL/min,洗脫峰在214?nm下進(jìn)行測(cè)定;收集具有最高金屬螯合活性的峰,利用RP-HPLC-C18反相高效液相色譜再進(jìn)行進(jìn)一步分離,反相HPLC的分離條件是用體積比為0-30%乙腈溶液作為洗脫液梯度洗脫,流速為4?mL/min,收集體積比為20%乙腈和80%水處的洗脫峰,得到所述的具有金屬螯合力的乳清蛋白肽。
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