[發明專利]一種金雞納樹皮中主要生物堿含量測定的HPLC方法

無效

• 申請號: 201410071152.0
• 申請日: 2014-03-01
• 公開（公告）號: CN103808828A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 彭學東;張梅;趙金召;申造
• 申請（專利權）人: 江蘇斯威森生物醫藥工程研究中心有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種金雞納樹皮中主要生物堿含量測定的HPLC方法：其特征在于以工業甲醇作為溶劑，從金雞納樹皮中提取主要生物堿成分，分別制備奎寧對照品溶液、奎尼丁對照品溶液、辛可寧對照品溶液、辛可尼丁對照品溶液和制備金雞納樹皮提取物供試品溶液；利用HPLC法在250nm波長下同時檢測金雞納樹皮提取物中奎寧、奎尼丁、辛可寧和辛可尼丁的含量；色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充物，以乙腈為流動相A，磷酸緩沖鹽溶液（pH=3.5）為流動相B，梯度洗脫程序為：時間0→5min→20min→40min→55min；溶液A：45%→45%→20%→10%→45%；溶液B：55%→55%→80%→90%→55%；柱溫25℃~40℃；流速0.8~1.5ml/min；檢測波長為250nm，進樣量10μl；理論塔板數按奎寧峰計算不得低于3000；對照品溶液的制備：分別取奎寧對照品、奎尼丁對照品、辛可寧對照品和辛可尼丁對照品適量，精密稱定，加甲醇適量，分別配置成濃度為10、5、1、0.5mg/ml的對照品溶液；供試品溶液的制備：取金雞納樹皮約10g，粉碎過60目篩，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，3%強堿浸泡，超聲破碎細胞，精密量取95%工業甲醇50ml，密塞，稱重，搖勻，超聲波提取30~40min，放冷，濾過，收集濾液，同法操作2次，合并濾液，置100ml容量瓶中，再用95%工業甲醇定容，搖勻，微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得；測定法：分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測定，即得。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于以95%的工業甲醇為溶劑制備金雞納樹皮提取物。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述色譜條件：色譜柱為Agilent-C₁₈（4.6×250mm，5μm），流動相為乙腈（A）—磷酸緩沖鹽溶液（pH=3.5）（B），梯度洗脫程序為：時間0→5min→20min→40min→55min；溶液A：45%→45%→20%→10%→45%；溶液B：55%→55%→80%→90%→55%；柱溫25℃~40℃；體積流量0.8~1.5ml/min；檢測波長為250nm，進樣量10μl。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述奎寧對照品、奎尼丁對照品、辛可寧對照品和辛可尼丁對照品溶液制備方法包括：分別取奎寧對照品、奎尼丁對照品、辛可寧對照品和辛可尼丁對照品適量，精密稱定，加甲醇適量，分別配置成濃度為10、5、1和0.5mg/ml的對照品溶液。

5.如權利要求1所述的方法，金雞納樹皮約10g，粉碎過60目篩，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，3%強堿浸泡，超聲破碎細胞，精密量取95%工業甲醇50ml，密塞，稱重，搖勻，超聲波提取30~40min，放冷，濾過，收集濾液，同法操作2次，合并濾液，置100ml容量瓶中，再用95%工業甲醇定容，搖勻，微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。