[發明專利]纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法在審
| 申請號: | 201410071081.4 | 申請日: | 2014-02-28 |
| 公開(公告)號: | CN103805589A | 公開(公告)日: | 2014-05-21 |
| 發明(設計)人: | 薛棟升;汪江波;彭春龍;周敏 | 申請(專利權)人: | 湖北工業大學 |
| 主分類號: | C12N11/04 | 分類號: | C12N11/04 |
| 代理公司: | 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 張火春 |
| 地址: | 430068 湖北*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 纖維素酶 交聯 晶體 硅膠 固定 方法 | ||
1.一種纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于包括如下步驟:將硅膠板用水清洗干凈,纖維素酶吸附后加入沉淀劑沉淀,加入交聯劑交聯,纖維素酶交聯晶體被固定在硅膠板上。
2.根據權利要求1所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于包括如下步驟:
(1)硅膠板預處理:將硅膠板用水浸泡、清洗后干燥;
(2)纖維素的吸附:將纖維素酶溶液與沉淀劑混合均勻,將預處理的硅膠板置于混合液中使纖維素吸附到硅膠板上;
(3)纖維素酶交聯晶體的固定:再加入交聯劑交聯形成纖維素酶交聯晶體,并固定在硅膠板上。
3.根據權利要求2所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于:步驟(2)中所述的沉淀劑為乙腈。
4.根據權利要求2所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于:步驟(3)中所述的交聯劑為戊二醛。
5.根據權利要求2所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于:步驟(1)硅膠板預處理為:將硅膠板在去離子水中浸泡4?h,然后用去離子水沖洗3次,在25?℃干燥24?h。
6.根據權利要求2所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于:步驟(2)纖維素的吸附為:將纖維素酶溶解在的檸檬酸緩沖液中,再加入冷卻到4?℃的乙腈混合均勻,預處理的硅膠板置于混合液中搖晃5?min,然后靜止20?min。
7.根據權利要求6所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于:纖維素酶與檸檬酸緩沖液的質量體積比為1:50,檸檬酸緩沖液與乙腈的體積比為1:2。
8.根據權利要求2所述的纖維素酶交聯晶體在硅膠板上的固定方法,其特征在于:步驟(3)纖維素酶交聯晶體的固定為:加入戊二醛溶液,于搖床中350?r/m搖動12?h。
9.一種固定有纖維素酶交聯晶體的硅膠板,通過權利要求1-8任一項所述的方法得到。
10.根據權利要求9所述的固定有纖維素酶交聯晶體的硅膠板,其特征在于:所述的硅膠板通過用去離子水沖洗后可重復利用。
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