[發明專利]一種用于指導他莫昔芬用藥的試劑盒

有效

• 申請號: 201410066908.2
• 申請日: 2014-02-26
• 公開（公告）號: CN104862308A
• 公開（公告）日: 2015-08-26
• 發明（設計）人: 文潔
• 申請（專利權）人: 文潔
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種用于指導他莫昔芬用藥的試劑盒。

背景技術

他莫昔芬（tamoxifen,TAM）作為一種雌激素受體調節的藥物，在臨床上常用于乳腺癌的輔助治療、化療等環節，能有效降低雌激素受體(ER)陽性乳腺癌患者的死亡率，提高其生活質量。TAM結構與雌激素相似，存在Z型和E型2個異構體。Z型異構體進入細胞內，與ER競爭結合，形成受體復合物，阻止雌激素作用的發揮，從而抑制乳腺癌細胞的增殖。

CYP2D6(cytochrome?P450,family2,subfamily?D,polypeptide6)為細胞色素P450酶系亞族蛋白。CYP2D基因存在于第22號染色體上，由CYP2D6、CYP2D7P、CYP2D8P組成，其中CYP2D7P和2D8P是假基因，只有CYP2D6基因能夠在肝臟及其它組織中表達，發揮代謝作用。

TAM在體內的代謝由多種藥物代謝酶參與。大約90%的TAM由CYP3A4/5滅活代謝成為N-去甲基TAM(血漿中的主要代謝產物)，另外10%TAM由CYP2D6激活代謝則轉化為4羥基-TAM，一種與ER的親和力是TAM的5-100倍的代謝產物。N-去甲基TAM和4羥基-TAM分別由CYP2D6和CYP3A4/5代謝為4-羥基-N-去甲基TAM(endoxifen)。最終4羥基-TAM和endoxifen均由磺?；D移酶(SUL?T1A1)結合后排出體外。Endoxifen(4-羥基-N-去甲基TAM(endoxifen)是一個抗雌激素活性與4-羥基TAM相當但血漿穩態濃度是其10倍的代謝產物。由于它的形成依賴于CYP2D6，所以CYP2D6的基因多態性對TAM代謝和臨床療效有重要意義。

臨床研究表明，CYP2D6基因第100位堿基的C>T突變（又稱100C>T點突變）和775位堿基A的缺失（又稱775delA突變）可以導致酶活性顯著下降。

個體基因的差異是一種普遍現象，所以個體化給藥不僅是勢在必行，而且必須從基因差異入手，采用藥物基因組學的方法。藥物基因組學通過對病人的基因檢測，如對一些疾病相關基因的SNP檢測，進而對特定藥物具敏感性或抵抗性的患病人群進行SNP差異檢測，指導臨床開出“基因合適”的藥方，使患者得到最佳治療效果，從而達到真正“用藥個體化”的目的。在分子診斷水平上建立以PCR為基礎的基因型分析方法，在治療病人各種疾病前檢測其基因型，更精確地選擇適當的治療藥物和合適的劑量以減少不良反應的發生，對病人的治療具有很大的意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于指導他莫昔芬用藥的試劑盒。

本發明保護一種引物組，由引物對甲和引物對乙組成；所述引物對甲由序列表的序列1所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；所述引物對乙由序列表的序列3所示的單鏈DNA分子和序列表的序列4所示的單鏈DNA分子組成。

本發明還保護所述引物組在制備用于鑒定CYP2D6基因的100C>T點突變和CYP2D6基因的775delA突變的試劑盒中的應用。

本發明還保護所述引物組在制備用于指導他莫昔芬用藥的試劑盒中的應用。

本發明還保護一種用于鑒定CYP2D6基因的100C>T點突變和CYP2D6基因的775delA突變的試劑盒，包括所述引物組。所述試劑盒還可包括陽性對照質粒。所述陽性對照質?？蔀閷⒕哂蠧YP2D6基因的100C>T點突變的DNA分子插入出發質粒得到的重組質粒甲和將具有CYP2D6基因的775delA突變的DNA分子插入出發質粒得到的重組質粒乙。所述重組質粒甲具體可為將序列表的序列5所示的雙鏈DNA分子插入pMD18-T質粒的多克隆位點（如SmaI和HindIII酶切位點之間）得到的重組質粒。所述重組質粒乙具體可為將序列表的序列6所示的雙鏈DNA分子插入pMD18-T質粒的多克隆位點（如SmaI和HindIII酶切位點之間）得到的重組質粒。所述試劑盒還可包括陰性對照。所述陰性對照具體可為水，如去離子水。所述試劑盒還可包括用于提取基因組DNA的試劑或試劑盒。所述試劑盒還可包括用于進行DNA測序的試劑、試劑盒或儀器。