[發(fā)明專利]煙草或其制品中可溶性蛋白質(zhì)含量的測定方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410066903.X
• 申請日: 2014-02-26
• 公開（公告）號: CN103822918A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇瑤;趙春雷;陶杰;高軍;丁嘉珅;章存勇
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽中煙再造煙葉科技有限責(zé)任公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 蚌埠鼎力專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 34102
• 代理人: 張建宏

1.煙草或其制品中可溶性蛋白質(zhì)含量的測定方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）稱取煙草或其制品樣品，加入蒸餾水溶解，然后超聲震蕩、離心得到待測樣品溶液；

（2）將?98%的牛血清蛋白溶于蒸餾水中，配制牛血清白蛋白儲備液，然后將儲備液稀釋成不同濃度的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液；

（3）將無水乙醇加入到容量瓶中，用蒸餾水定容，配成90%的乙醇溶液；

（4）將考馬斯亮藍(lán)G-250溶于上述?90%的乙醇中，加入質(zhì)量濃度為850?g/L的磷酸，最后用蒸餾水定容，再加入Brij-35，配成考馬斯亮藍(lán)G-250標(biāo)準(zhǔn)溶液；

（5）將牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與考馬斯亮藍(lán)G-250標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測樣品溶液結(jié)合，通過連續(xù)流動分析儀的程序運(yùn)行將各試劑按序進(jìn)樣，在595?nm波長下檢測待測樣品中可溶性蛋白質(zhì)的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的煙草或其制品中可溶性蛋白質(zhì)含量的測定方法，其特征在于包括以下具體步驟：?

（1）稱取煙草或其制品樣品0.25～1.0?g，加入蒸餾水25～100?mL溶解，然后超聲震蕩20～45?min、以3000-10000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心5～20?min，將上清液通過中速定量無灰濾紙過濾至樣品杯中，得到待測樣品溶液；

（2）稱取1.0?g牛血清蛋白溶于蒸餾水中，定容至100?mL，中速定量無灰濾紙過濾，得到10?mg/mL的牛血清白蛋白儲備液，然后將儲備液稀釋成濃度為1.0?mg/mL、0.8?mg/mL、0.6?mg/mL、0.4?mg/mL和0.2?mg/mL的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液各100?mL；

（3）量取900?mL無水乙醇加入到1000?mL容量瓶中，用蒸餾水定容至1000?mL，中速定量無灰濾紙過濾，得到90%的乙醇溶液；

（4）稱取100?mg考馬斯亮藍(lán)G-250溶于50?mL上述?90%的乙醇中，加入質(zhì)量濃度850?g/L的磷酸100?mL，最后用蒸餾水定容至1000?mL，加入0.5?mL?Brij-35，中速定量無灰濾紙過濾，得到考馬斯亮藍(lán)G-250標(biāo)準(zhǔn)溶液；

（5）將牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測樣品溶液分別與考馬斯亮藍(lán)G-250標(biāo)準(zhǔn)溶液結(jié)合，通過連續(xù)流動分析儀的程序運(yùn)行將各試劑按序進(jìn)樣，在595?nm波長下檢測待測樣品中可溶性蛋白質(zhì)的含量。

3.如權(quán)利要求2所述的煙草或其制品中可溶性蛋白質(zhì)含量的測定方法，其特征在于：步驟（5）中連續(xù)流動分析儀的進(jìn)樣速率為30～40個(gè)樣品/小時(shí)，進(jìn)樣清洗比例為1:1。

4.如權(quán)利要求1或2所述的煙草或其制品中可溶性蛋白質(zhì)含量的測定方法，其特征在于：還包括步驟（6），所述步驟（6）為按YC/T31-1996標(biāo)準(zhǔn)方法測定待測樣品中的水分含量，進(jìn)而計(jì)算待測樣品中可溶性蛋白質(zhì)的絕干含量。