[發(fā)明專利]支鏈α-葡聚糖及生成其的α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶和它們的制造方法以及用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410065367.1 | 申請日： | 2008-04-23 |
| 公開（公告）號： | CN103865967B | 公開（公告）日： | 2018-08-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 渡邊光;山本拓生;西本友之;津崎桂二;奧和之;茶圓博人;福田惠溫 | 申請（專利權(quán)）人： | 株式會社林原 |
| 主分類號： | C12P19/14 | 分類號： | C12P19/14;C12P19/04;C08B37/02;C12N9/10;A61K31/716;A61K8/73;A61P3/10;A61P3/04 |
| 代理公司： | 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038 | 代理人： | 李英 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 聚糖 生成 葡糖 轉(zhuǎn)移酶 它們 制造 方法 以及 用途 | ||
1.一種以葡萄糖為構(gòu)成糖的支鏈α-葡聚糖的混合物，其是作為水溶性食物纖維有用的混合物，其特征在于
其具有下列(A)～(E)的特征：
(A)作為整體在甲基化分析中具有下述(1)～(4)的特征：
(1)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6～1:4的范圍；
(2)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的總計占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60％以上；
(3)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5％以上且小于10％；及
(4)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5％以上；
(B)當(dāng)其被異麥芽糖糊精酶消化時，每單位消化物的固體成分生成異麥芽糖25質(zhì)量％以上50質(zhì)量％以下；
(C)利用作為高效液相色譜法的酶-HPLC法求出的水溶性食物纖維含量為40質(zhì)量％以上；
(D)基于凝膠過濾高效液相色譜法的分子量分布分析得到的重均分子量是2,979道爾頓以上、65,700道爾頓以下；
(E)重均分子量除以數(shù)均分子量所得的值小于20；且
其通過將α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶作用于麥芽糖和/或葡萄糖聚合度3以上的α-1,4葡聚糖而得到，所述α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶源于具有下述酶活性(F)的屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)或節(jié)桿菌屬(Arthrobacter)的微生物：
(F)當(dāng)所述α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶在40℃、pH6.0作用于1w/v％的麥芽五糖水溶液24小時時，生成支鏈α-葡聚糖的混合物，所述支鏈α-葡聚糖的混合物作為整體在甲基化分析中具有下述(5)～(8)的特征：
(5)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6～1:4的范圍；
(6)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的總計占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60％以上；
(7)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5％以上且小于10％；及
(8)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5％以上。
2.一種屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)或節(jié)桿菌屬(Arthrobacter)的微生物來源的α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶，其特征在于，
當(dāng)所述α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶在40℃、pH6.0作用于1w/v％的麥芽五糖水溶液24小時時，具有生成支鏈α-葡聚糖混合物的活性，所述支鏈α-葡聚糖的混合物作為整體在甲基化分析中具有下述(1)～(4)的特征：
(1)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇之比在1:0.6～1:4的范圍；
(2)2,3,6-三甲基-1,4,5-三乙酰基葡萄糖醇和2,3,4-三甲基-1,5,6-三乙酰基葡萄糖醇的總計占部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的60％以上；
(3)2,4,6-三甲基-1,3,5-三乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5％以上且小于10％；及
(4)2,4-二甲基-1,3,5,6-四乙酰基葡萄糖醇為部分甲基化葡萄糖醇乙酸酯的0.5％以上，且
所述α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶具有下述(a)～(e)的理化性質(zhì)：
(a)分子量：在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中，為90,000±10,000道爾頓；
(b)最適溫度：在pH6.0反應(yīng)30分鐘的條件下，為50～55℃；
(c)最適pH：在40℃反應(yīng)30分鐘的條件下，為5.0～6.3；
(d)溫度穩(wěn)定性：在pH6.0保持60分鐘的條件下，40℃以下是穩(wěn)定的；及
(e)pH穩(wěn)定性：在4℃保持24小時的條件下，至少在pH4.0～8.0內(nèi)穩(wěn)定。
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