[發明專利]印度芽孢桿菌的發酵培養方法

無效

• 申請號: 201410063650.0
• 申請日: 2014-02-25
• 公開（公告）號: CN104099264A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發明（設計）人: 張東升;李華;劉洋;宋堅;王震;毛東東
• 申請（專利權）人: 大連海洋大學;張東升
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 大連非凡專利事務所 21220
• 代理人: 高學剛

技術領域

本發明涉及一種菌的發酵培養方法，特別是一種印度芽孢桿菌的發酵培養方法。?

背景技術

印度芽孢桿菌最早（2004年）發現于印度一淡水水域，在2009年首次發現它存在于海水中，2010年發現其細胞內含有胃液不能破壞的類胡羅卜素，可安全地用做食品添加劑；目前實驗室培養印度芽孢桿菌主要利用常規實驗用的牛肉膏蛋白胨或是2216E培養基，用這種常規培養基大量培養印度芽孢桿菌的成本較高，不利于印度芽孢桿菌的推廣和應用。因此現在業內人員期望找到一種成本低廉的培育印度芽孢桿菌的方法。?

發明內容

本發明是為了解決現有技術所存在的上述不足，提出一種操作簡便，成本低廉，適合于推廣和應用的印度芽孢桿菌的發酵培養方法。?

本發明的技術解決方案是：一種印度芽孢桿菌的發酵培養方法，其特征在于：所述的方法按照以下步驟進行：?

向pH為7-7.5的培養基中接種印度芽孢桿菌，接種量為1-2%，培養溫度為25-30℃，裝液量為容器的20-40%，搖床轉速為150-170r/min，培養時間為48小時，培養基為海水溶液，其中豆粕含量為0.2-0.4g/100ml，麥麩含量為0.2-0.4g/100ml，酵母膏含量為0.1g/100ml。

本發明同現有技術相比，具有如下優點：?

本發明所公開的印度芽孢桿菌的發酵培養方法，其操作簡單，行之有效。現在業內并沒有大規模發酵培養印度芽孢桿菌的方法，傳統的實驗室培養發放需要使用蛋白胨和牛肉膏作為培養基，其價格較為昂貴，不利于印度芽孢桿菌的大規模、批量化培養，而本發明則公開了一種價格低廉、應用廣泛的原料作為培養基，按照合適的比例和條件，可以培養出細胞數量較高、類胡蘿卜素含量較高的印度芽孢桿菌，其成本相比于傳統的培養基可降低百余倍。因此可以說這種方法具備了多種優點，特別適合于在本領域中推廣應用，其市場前景十分廣闊。

具體實施方式

下面將說明本發明實施例的具體實施方式。一種印度芽孢桿菌的發酵培養方法，按照以下步驟進行：首先配置培養基，培養基為以海水為基礎的海水溶液，其中豆粕含量為0.2-0.4g/100ml，麥麩含量為0.2-0.4g/100ml，酵母膏含量為0.1g/100ml；配置完成后將培養基的pH值調節至7-7.5，然后向培養基中接種印度芽孢桿菌，這里所選用的印度芽孢桿菌為印度芽孢桿菌L15，該菌種已于2013年保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.1.12725。接種的印度芽孢桿菌L15的濃度為10⁸cfu/ml，接種量為1-2%，培養溫度為25-30℃，接種后的培養基放入發酵罐等容器中，其裝液量為容器的20-40%，將容器放置在搖床上，搖床的轉速為150-170r/min，培育48小時，培育出印度芽孢桿菌L15的數量最高可達10¹²cfu/ml。?

[0007]?印度芽孢桿菌L15菌株保藏日期：2013年11月1日；?

分類命名：Bacillus?indius；

保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）；

保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號

保藏號：CGMCC?No.?1.12725。