[發(fā)明專利]實現(xiàn)胚胎裝入冷凍載體的系統(tǒng)、冷凍載體及冷凍保存方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410062556.3
• 申請日: 2014-02-24
• 公開（公告）號: CN104855371B
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張孝東;黃國寧
• 申請（專利權(quán)）人: 張孝東
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 張超

本發(fā)明公開一種實現(xiàn)胚胎裝入冷凍載體的系統(tǒng)、冷凍載體及冷凍保存方法，其中卵子或胚胎玻璃化冷凍載體包括：載體本體，與所述載體本體一體相連、拖拉所述載體本體的拖桿，其中所述載體本體為網(wǎng)格承載體，所述網(wǎng)格承載體在縱截面上具有弧度；由于卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的所述網(wǎng)格承載體在縱截面上具有弧度，在網(wǎng)格承載體和培養(yǎng)皿底部形成液體橋梁后，通過虹吸原理可將勢能高、壓強大的網(wǎng)格承載體上的液體繼續(xù)壓入培養(yǎng)皿底部，從而可以在胚胎裝入玻璃化冷凍載體時減少包裹卵子/胚胎周圍冷凍保護劑體積。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物技術(shù)領(lǐng)域，更確切的說涉及一種實現(xiàn)胚胎裝入冷凍載體的系統(tǒng)、冷凍載體及冷凍保存方法。

背景技術(shù)

冷凍技術(shù)在人類輔助生殖技術(shù)中已經(jīng)成為不可或缺的環(huán)節(jié)，隨著冷凍技術(shù)的不斷發(fā)展，慢速冷凍已經(jīng)逐漸被玻璃化冷凍所取代。玻璃化冷凍技術(shù)通過超高的降溫速度（＞2000℃/分鐘）使包裹在高濃度冷凍保護劑中的卵子/胚胎迅速形成玻璃態(tài)，避免細胞內(nèi)冰晶產(chǎn)生損傷細胞，從而大幅度提高卵子/胚胎存活率、復蘇率及發(fā)育潛能。

一般的，通過二個方面可以實現(xiàn)高速降溫過程：一是通過降溫介質(zhì)的溫度（通過開放載體迅速投入液氮實現(xiàn)）；二是控制包裹卵子/胚胎周圍冷凍保護劑體積越小越好。

但對于第二點，實際工作中，通過實驗人員的操作將卵子/胚胎連同冷凍保護劑一起轉(zhuǎn)移至玻璃化載體上，包裹卵子/胚胎周圍冷凍保護劑體積完全是由操作人員的熟練程度決定而無客觀標準。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種實現(xiàn)胚胎裝入冷凍載體的系統(tǒng)、冷凍載體及冷凍保存方法，以在胚胎裝入玻璃化冷凍載體時減少包裹卵子/胚胎周圍冷凍保護劑體積。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種實現(xiàn)胚胎裝入冷凍載體的系統(tǒng)，其包括：培養(yǎng)皿和卵子或胚胎玻璃化冷凍載體，其中該卵子或胚胎玻璃化冷凍載體包括：

載體本體，與所述載體本體一體相連、拖拉所述載體本體的拖桿，其中所述載體本體為網(wǎng)格承載體，所述網(wǎng)格承載體在縱截面上具有弧度；

所述卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的網(wǎng)格承載體的弧度最底面貼合培養(yǎng)皿底部，借助卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的拖桿，該卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的網(wǎng)格承載體隨拖桿在培養(yǎng)皿底部移動使網(wǎng)格承載體中承載的卵子或胚胎周圍的冷凍液沿拖動方向轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿底部。

進一步的，所述弧度為半圓弧。

進一步的，網(wǎng)格承載體的網(wǎng)格孔徑為80-100um。

另外，本發(fā)明還公開一種卵子或胚胎玻璃化冷凍載體，其包括：

載體本體，與所述載體本體一體相連、拖拉所述載體本體的拖桿，其中所述載體本體為網(wǎng)格承載體，所述網(wǎng)格承載體在縱截面上具有弧度。

進一步的，所述弧度為半圓弧。

進一步的，網(wǎng)格承載體的網(wǎng)格孔徑為80-100um。

另外，本發(fā)明還公開一種卵子或胚胎玻璃化冷凍保存方法，包括：卵子或胚胎平衡操作步驟、玻璃化冷凍液清洗步驟、胚胎裝入載體步驟，其中，所述胚胎裝入載體步驟包括有：

步驟11：將卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的網(wǎng)格承載體置于15%乙二醇+15%二甲基亞砜的玻璃化冷凍液中進行浸潤；

步驟12：將完全侵潤的卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的網(wǎng)格承載體放置在培養(yǎng)皿內(nèi)；

步驟13：將玻璃化冷凍操作步驟中的清洗后的胚胎吸入玻璃吸管，再轉(zhuǎn)移至卵子或胚胎玻璃化冷凍載體的網(wǎng)格承載體上，并將玻璃吸管內(nèi)所有剩余液體全部吹打到網(wǎng)格承載體表面；