[發明專利]HPLC-DAD法同時測定四物湯煎劑中10種化學成分含量的方法

有效

• 申請號: 201410062372.7
• 申請日: 2014-02-25
• 公開（公告）號: CN103808835A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 劉曉;蔡皓;蔡寶昌;張科衛;裴科
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02;G01N30/86
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1.一種使用HPLC-DAD同時測定四物湯煎劑中10種化學成分含量的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)混合對照品溶液的配制：

分別精密稱取沒食子酸，5-羥甲基糠醛，兒茶素，白芍苷，芍藥苷，阿魏酸，毛蕊花糖苷，洋川芎內酯I，洋川芎內酯A，z-藁本內酯對照品適量，加甲醇溶解稀釋，搖勻，得到濃度分別為182.00，64.40，239.00，789.00，357.00，136.00，17.00，61.00，78.00，158.50，123.20μg·mL^-1的混合對照品溶液；

(2)供試品溶液的配制：

按照四物湯的比例，分別精密稱取熟地15g，當歸10g，白芍10g，川芎6g，于煎藥鍋中，先加8倍量的水，浸泡1h，武火煮沸后，文火保持微沸狀態煎煮30min，以四層紗布濾出藥液，藥渣再加5倍量的水武火煮沸后，文火保持微沸狀態煎煮20min，四層紗布濾出藥液，合并兩次煎液，濃縮到300mL，用移液管精密移取4.0mL藥液與6.0mL甲醇于錐形瓶中，稱定重量，超聲30分鐘，用60％的甲醇補足減失重量，4500r／min，高速離心10min，吸取上清液用0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液，即得；

測定法：采用HPLC-DAD法測定混合對照品及10批供試品的濃度，應用的色譜條件：色譜柱：elit?C_l8：250mm×4.6mm，5μm；檢測波長：280nm；流速：0.8mL·min^-1；柱溫：30℃；進樣量：20μL；梯度洗脫條件：0～2.0min，體積分數為2％的甲醇等度洗脫，2.0～15.0min線性增加至20％的甲醇，15.0～25.0min為體積分數20％的甲醇等度洗脫，25.0～42.0min線性增加至100％的甲醇，42.0～45.0min為100％的甲醇等度洗脫。