[發明專利]一種新型T載體及其應用方法在審
| 申請號： | 201410061452.0 | 申請日： | 2014-02-24 |
| 公開（公告）號： | CN103865943A | 公開（公告）日： | 2014-06-18 |
| 發明（設計）人： | 邵蔚藍;周蓉;王洪成 | 申請（專利權）人： | 南京仙奕基因科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/63 | 分類號： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 211103 江蘇省南京市麒*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 新型 載體 及其 應用 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種新型表達型T載體，其基本特征在于在兩個末端TA連接位點的上游各有1個強啟動子及相應的基因表達元件（含轉錄起始位點、核糖體結合位點和下游的轉錄終止子），使正向和反向插入的外源基因都能得到有效表達。
2.如權利要求1所述T載體，其特征在于將pHsh系列載體構建成T載體，使pHsh表達質粒的構建不再需要限制性內切酶切割，從而基因的克隆不再受限于酶切位點的匹配性。
3.如權利要求1所述T載體，其特征在于具有大腸桿菌載體系統pHsh的基本結構和高效表達功能，利用熱激（Hsh）啟動子對目標基因的表達進行調控。
4.如權利要求3所述的表達型T載體，其特征在于在Hsh啟動子的相反方向安裝1個人工設計合成的持家基因（Hkg）啟動子，使反向插入的目標基因能夠自由表達。
5.如權利要求4所述T載體的用途，其特征在于不僅適用于PCR產物的克隆和表達，還可以應用于基因文庫的構建和篩選。
6.如權利要求5所述T載體的應用方法，其特征在于在構建基因文庫的過程中，用Taq?DNA聚合酶處理擬與T載體連接的DNA片段的末端，使它們都帶有3’端懸掛的堿基A。
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