[發明專利]甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法

無效

• 申請號: 201410058578.2
• 申請日: 2014-02-21
• 公開（公告）號: CN103798044A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 徐振;謝逸萍;趙永強;曹清河;孫厚俊;唐君;楊冬靜;張成玲;魏猛
• 申請（專利權）人: 江蘇徐州甘薯研究中心
• 主分類號: A01G1/00
• 分類號: A01G1/00;A01G7/00;A01K67/033
• 代理公司: 徐州市三聯專利事務所 32220
• 代理人: 周愛芳

技術領域

本發明涉及一種農作物近緣野生種抗莖線蟲病的抗性鑒定方法，具體的說是一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病的抗性鑒定方法，屬于農業植物保護領域。

背景技術

我國是世界第一大甘薯生產國，近年甘薯種植面積約為7000萬畝，占世界甘薯種植面積的50.0％左右。甘薯莖線蟲病是影響甘薯產量和品質最為嚴重的病害之一，經南京農業大學丁再福等鑒定，甘薯莖線蟲病的病原為馬鈴薯腐爛莖線蟲（Ditylenchus?destructor?Thome），屬線蟲綱，墊刃目，莖線蟲屬。甘薯莖線蟲病在我國主要分布在河北、河南、山東、山西、安徽、江蘇等省。該病害在甘薯貯藏期可導致爛窖，育苗期可引起爛床。大田期甘薯受害后，薯塊出現糠心，表皮龜裂等癥狀，一般年份可引起甘薯減產10-20％，嚴重年份可達50-60％，甚至絕收，現已成為我國北方薯區最為嚴重的病害之一?？剐杂N是控制莖線蟲病最為經濟有效的方法，然而，在現有的甘薯品種中，可利用的抗性材料十分有限。自1949年以來，我國94%育成品種與南瑞苕和勝利百號有血緣關系，導致甘薯遺傳背景狹窄，制約了甘薯品種改良的進度和質量。甘薯近緣野生資源十分豐富，其中很多野生種具有抗病蟲害的優良基因，這為從根本上解決甘薯遺傳基礎狹窄，有效資源匱乏，品種遺傳改良緩慢等問題提供了可能。因此開展甘薯近緣野生種有益性狀鑒定工作能夠有效的促進甘薯品種改良和對病蟲害抗性的提高。與甘薯不同，并不是所有甘薯野生種都能形成塊狀根，所以打孔接種的抗線鑒定方法不適用于野生種，且目前尚未見標準的甘薯野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法。

發明內容

本發明提供一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法，操作過程簡單，實驗周期短，且能夠避免試驗材料對環境造成的污染。試驗結果能夠全面的體現甘薯近緣野生種對莖線蟲病的抗性水平。是評價甘薯野生種抗莖線蟲病抗性的有效方法。

本發明是以如下技術方案實現的：一種甘薯近緣野生種抗莖線蟲病抗性鑒定方法，將待鑒定的甘薯野生種單棵栽種于花盆中，采用根部滴加法向每盆接種200頭莖線蟲，40天后挖取野生種地下莖部分，對莖線蟲病的為害情況進行調查，評價甘薯野生種抗莖線蟲病抗性；具體按如下步驟進行：

（1）莖線蟲培養：在田間采集莖線蟲病發病薯塊，帶回實驗室后用淺盤法分離莖線蟲；鏡檢確定為甘薯莖線蟲后，用1%硫酸鏈霉素消毒，滅菌水沖洗3次，采用打孔法將莖線蟲接種于莖線蟲高感品種栗子香薯塊中，用石蠟封口，置于25℃培養箱中培養，備用；

（2）待測材料準備：向直徑為10cm的圓形塑料花盆中裝入1kg滅菌后的土壤，將待測甘薯野生種栽種于花盆中，每盆栽種1棵。將甘薯野生種防治于植物生長間中，在25℃,80%濕度，光周期14/10（L/D）的條件下培養；每天；澆水，將花盆中土壤濕度大約控制在18-25%范圍內；

（3）待甘薯野生種幼苗長出4片真葉時接入莖線蟲。莖線蟲接種時，先在幼苗根圍打一深5cm的小孔，將5ml消毒的莖線蟲懸浮液（含200頭莖線蟲）加入到小孔中，后用土將孔填平；每個鑒定的野生種栽種5盆，即5次重復，可以甘薯品種栗子香為感病對照；接種莖線蟲40天后對莖線蟲病的發病情況進行調查；

（4）發病情況調查：將野生種苗挖出后用清水沖洗干凈，用解剖剪將地下莖剖開，測量受害部寬度，根據受害部所占比例對病害進行分級；

分級標準：

0級：全株不發病；

1級：開始發病，尚不明顯；

2級：受害部達全株1/3；

3級：受害部達全株1/2；

4級：受害部達全株2/3；

5級：全株發病。

對樣品進行分級后，根據以下公式計算病情指數：

分級標準：

高感：病指≥80%；感?。?0%＞病指≥60%；中抗：60%＞病指≥40%；

抗?。?0%＞病指≥20%；高抗：20%＞病指。

本發明的有益效果是：該鑒定方法處理手段科學有效，操作過程簡單。采用室內盆栽的方法大大縮短了試驗周期，不受季節限制，且能夠避免試驗材料對環境造成的污染。根部滴加法接種莖線蟲，可同時評價鑒定樣品的抗侵入性和抗擴展性，試驗結果可更全面的體現野生種對莖線蟲病的抗性水平。

附圖說明

圖1是不同莖線蟲接種劑量在薯苗內種群增長情況。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步說明：

實施例1：