[發(fā)明專利]甘藍型油菜P17673啟動子及制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410058212.5
• 申請日: 2014-02-20
• 公開（公告）號: CN103789314A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設計）人: 劉勝毅;董彩華;黃軍艷;程曉輝;童超波;于景印;劉越英
• 申請（專利權）人: 中國農(nóng)業(yè)科學院油料作物研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/10;C12N15/84;A01H5/02
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術領域

本發(fā)明涉及植物基因工程和生物技術領域，具體涉及一種甘藍型油菜Bn17673基因啟動子（命名為P17673，以下相同），同時還涉及一種甘藍型油菜P17673啟動子的制備方法。本發(fā)明還涉及含有該啟動子或其實質(zhì)同源核苷酸序列的載體和涉及利用該啟動子在油菜及擬南芥中的應用。

背景技術

植物基因啟動子是位于結構基因5’端上游區(qū)、含有順式作用元件的一段DNA序列，決定著下游基因轉錄的特異性、方向和效率，是基因轉錄調(diào)控機制和表達模式中最關鍵的因子。此外，外源基因在植物細胞中表達是植物基因工程研究的關鍵，而外源基因的表達首先取決于其轉錄的啟動，在某種程度上，啟動子決定了基因表達的時空順序以及表達強度。因此，發(fā)掘和研究新型啟動子對于基因表達調(diào)控機制研究和轉基因研究具有非常重要的科學意義。

通過對多種植物基因啟動子區(qū)的分析發(fā)現(xiàn)，絕大多數(shù)功能蛋白基因的啟動子都具有共同的結構模式，一般由啟動子核心元件和上游元件組成。位于轉錄起始位點上游-20--30?bp處的TATA?box為啟動子核心元件，是富含有AT的保守序列區(qū)，與DNA雙鏈的解鏈有關，并決定轉錄起始點的選擇，是絕大多數(shù)植物啟動子正確表達所必需的。TATA?box上游的保守序列稱為啟動子上游元件，包括上游-75bp處的CAAT?box和-80--110bp附近的GC?box等一般上游啟動子元件及其他特殊的上游元件，如茉莉酸類物質(zhì)應答元件（JRE）、乙烯響應元件（ERE）等元件（張春曉等，植物基因啟動子研究進展。遺傳學報，2004，31（12）：1455-1464；路靜等，高等植物啟動子及其應用研究進展。自然科學進展，2004，14（8）：856-862）。CAAT?box是比較保守的序列，與RNA聚合酶的識別和結合有關，對基因轉錄有較強的激活作用。然而有些基因無此框，如禾谷類作物的貯藏蛋白基因中無CAAT框而被CATC框代替。GC?box的保守序列是5‘GGGCGG3’，可有多個拷貝，并能以任何方向存在而不影響其功能（路靜，趙華燕，何奕昆，宋艷茹，高等植物啟動子及其應用研究進展。自然科學進展，2004，14（8）：856-862；夏江東，陳在全，吳渝生，季鵬章，高等植物啟動子功能和結構研究進展。云南農(nóng)業(yè)大學學報，2006，21（1）：7-14）。只要具有了這些保守的結構框，那么就可以具有相應的啟動下游基因表達的功能。