[發明專利]一種針對靶標的即時定量分析方法

有效

• 申請號: 201410057505.1
• 申請日: 2014-02-20
• 公開（公告）號: CN103913542B
• 公開（公告）日: 2017-06-16
• 發明（設計）人: 楊朝勇;官志超;郟莎莎;朱志
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司35204
• 代理人: 張松亭

技術領域

本發明涉及一種針對可卡因等多種靶標的即時可視化定量分析方法，屬于可視化定量分析方法技術領域。

背景技術

水凝膠是一類親水性的高分子聚合物，能夠在水環境下發生溶脹，依靠物理交聯或化學交聯兩種方式生成。凝膠結構能夠響應多種環境參數，如溫度，pH，離子強度和溶劑組成等，而發生改變，因而也被稱作“智能水凝膠”。基于各種傳統意義上的水凝膠構建的傳感器在響應各種外界信號并發生性質改變后，通常還要結合一些復雜、精密的儀器對特征變化進行表征和記錄，這樣往往耗時費力，不適合普及。DNA交聯水凝膠的出現，極大地擴展了水凝膠傳感器的應用范圍（1、Liu J，Liu H，Kang H，et.al.，Aptamer-incorporated hydrogels for visual detection，controlled drug release,and targeted cancer therapy[J].Anal Bioanal Chem(2012)402:187–194.）。

核酸適體作為一類新型的分析、診斷分子，自出現以來，受到科研工作者的廣泛關注。因其優于傳統蛋白單克隆抗體的諸多特性，核酸適體已成為新興的研究工具，在科研、疾病診斷和治療試劑等方面逐步取代傳統的抗體類診斷和生物技術產品（2、Gold L.，PoliskyB.，Uhlenbeck O.，et.al.，Diversity of oligonucleotide functions,Annual Review of Biochemistry[J].1995,64.763-797；3、Jayasena S.，Aptamers:An emerging class of molecules that rival antibodies in diagnostics,Clinical Chemistry[J].1999,45.1628-1650；4、Wilson D.，Szostak J.，In vitro selection of functional nucleic acids,Annual Review of Biochemistry[J].1999,68.611-647；5、Joyce G.，In-vitro evolution of nucleic-acids，Current Opinion in Structural Biology[J].1994,4.331-336.）。核酸適體是指從人工合成的DNA/RNA庫中篩選得到的能夠與靶標分子結合的單鏈寡核苷酸。核酸適體技術存在的基礎是核酸適體借助氫鍵、范德華力、疏水作用等分子間作用力形成的特殊的三維結構，如發夾、假結、凸環、G-四聚體等（6、Li,F.,Zhang,J.,Cao,X.N.,Wang,L.H.,Li,D.,Song,S.P.,Ye,B.C.,Fan,C.H.,Adenosine detection by using gold nanoparticles and designed aptamer sequences,Analyst[J].2009,134.1355-1360.）。另一方面，核酸適體的特異性很高，如茶堿與其RNA核酸適體的親和力相當于其類似物如咖啡因(與茶堿只相差一個堿基)的10,000倍（7、Kato,T.,Takemura,T.,Yano,K.,Ikebukuro,K.,Karube,I.,In vitro selection of DNA aptamers which bind to cholic acid,Biochimica Et Biophysica Acta-Gene Structure and Expression[J].2000,1493.12-18.），還可以將氨基酸、腺苷等生物小分子的突變體、異構體區分開來。核酸適體技術在分子生物學中的應用對象相當廣泛，涵蓋了離子、小分子、生物大分子以及細胞。應用目的則相對專一，主要是檢測和分析。