[發明專利]一種桑枝皮中血管緊張素轉換酶抑制劑的分離純化法

有效

• 申請號: 201410055650.6
• 申請日: 2014-02-19
• 公開（公告）號: CN103830326A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發明（設計）人: 桂仲爭;賈俊強;劉艷偉
• 申請（專利權）人: 江蘇科技大學
• 主分類號: A61K36/605
• 分類號: A61K36/605;A61P9/12;A61K129/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域：

本發明涉及一種活性物質的分離方法，具體地講是涉及一種提取分離桑枝皮中降血壓活性物質（ACE）的方法。

背景技術：

桑枝白皮是一味傳統的中藥材，含有多種活性成分，如黃酮類，多糖和生物堿類等。研究表明，桑枝提取物對人體具有明顯的抗潰瘍、解痙、抗菌、抗炎、降血糖、降血脂和鎮痛等作用。吳志平等（2005）在《蠶業科學》報道桑枝的降血糖功效優于常用的桑白皮和桑葉。邢冬杰等（2010，中國實用醫藥）和劉先明等（2011，蠶業科學）研究表明桑枝提取物能顯著降低血漿甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、全血黏度、血漿黏度的水平，使血脂、血液流變學指標得到改善。馬永雷等（2010，蠶業科學）報道了桑枝皮醇提物具有抗氧化作用并可以抑制α-糖苷酶活性，具有降血糖和抗腫瘤等生物活性。目前，相關發明專利有：桑枝生物堿有效部位在制備降血糖藥物中的應用（ZL200610111644.3），桑枝黃酮和二苯乙烯類提取物在預防或治療高尿酸血癥和痛風中的應用（ZL200910095836.3），中草藥桑枝獨活南紅花治療脊髓灰質炎后遺癥的新用途（ZL200810189854.3）,一種桑枝皮中各組分的提取和分離方法(ZL201110041431.9)，桑葉和/或桑枝提取物的制備方法及所得產品和應用(ZL201010261582.0),桑枝皮中具有抑制α-糖苷酶活性的水溶性生物堿純化方法及應用(ZL201210118472.8)，緩解類風濕性關節炎桑枝生地中藥口服液及制備方法(ZL201210182097.3),一種桑枝皮果膠的高效提取方法(ZL201210187112.3)，等等。

然而，迄今尚未見有關桑枝皮ACE抑制劑提取工藝的報道，以桑枝皮為原料開發無毒副作用的降血壓物質，將為高血壓患者提供更多的治療手段。

發明內容：

本發明的目的是提供一種桑枝皮中ACE抑制劑的分離純化的方法，具有較高得率，所得ACE抑制劑純度高。

為了達到上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一種桑枝皮中ACE抑制劑的分離純化的方法，步驟如下：

（1）桑枝皮剝離及粉碎處理：

將桑枝皮與其本質部分離，桑枝皮自然晾干或50℃烘干，粉碎過20-30目篩；

（2）桑枝皮中ACE抑制劑有效成分的提取：

稱取粉碎過篩后的桑枝皮，加水，配制成濃度為6-8%的桑枝皮懸浮液，加纖維素酶3200-3800U/g，調節pH為4.5-5.0，超聲波細胞破壁浸提、分離60-70min，過濾，調節提取液pH值6.5-7.5，在5000r/min條件下離心15-20min，分離上清液，即得桑枝皮提取液。

（3）離子交換柱層析：

將桑枝皮浸提液上陰離子樹脂201×7交換柱層析；分別用水和NH₄OH洗脫；收集ACE抑制劑含量最高的洗脫液。

（4）分子篩層析：

選用葡聚糖凝膠G-25，根據洗脫成分分子量的大小進一步分離樣品，用等2-3倍柱體積的蒸餾水洗脫，收集ACE抑制率最高的洗脫液，冷凍干燥，保存備用。

本發明的桑枝皮中ACE抑制劑的分離純化方法的優點和有益效果：

1.以桑樹枝條為原料，易于獲得，原料來源豐富；同時深加工桑枝條，有利于廢物再利用，減少對環境的污染。

2.經纖維素酶提取、陰離子樹脂201×7層析、葡聚糖凝膠G-25分子篩再純化等步驟，最終可獲得對ACE抑制率達87%以上原料粉，純度達73%。

附圖說明

圖1為實施例1所提取的ACE抑制劑的譜圖。

具體實施方式

實施例1

一種桑枝皮中ACE抑制劑的分離純化的方法，步驟如下：

1.原料處理：取新鮮桑枝，剝皮，洗凈，50℃烘干，粉碎過20-30目篩備用。

2.桑枝皮ACE抑制劑有效成分的提取：

稱取粉碎后的桑枝皮粉末，加水，配制成質量濃度為6-8%的桑枝皮懸浮液，加纖維素酶3200-3800U/g，調節pH為4.5-5.0，經超聲（功率80-90W），提取60-70min，過濾，提取液pH值調節在6.5-7.5范圍，在5000r/min條件下離心15-20min，分離上清液，即得桑枝皮提取液。

3.樹脂分離純化：