[發明專利]一種檢測P73基因及其啟動子區甲基化狀態的MSP法檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410054962.5
• 申請日: 2014-02-18
• 公開（公告）號: CN103911429A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 湯郡;陳南;陳穎;何娟
• 申請（專利權）人: 廣州金域醫學檢驗中心有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.用于檢測P73基因甲基化狀態的引物組，其包含一對以上根據P73基因外顯子或啟動子序列設計的引物。

2.權利要求1所述的引物組，由序列為SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2的P73基因甲基化引物對、序列為SEQ?ID?NO：3和SEQ?ID?NO：4的P73基因非甲基化引物對、序列為SEQ?ID?NO：5和SEQ?ID?NO：6的P73基因啟動子區甲基化引物對以及序列為SEQ?ID?NO：7和SEQ?ID?NO：8的P73基因啟動子區非甲基化引物對組成。

3.權利要求2的引物組在制備用于檢測P73基因及其啟動子區甲基化狀態的試劑中的應用。

4.一種檢測P73基因及其啟動子區甲基化狀態的MSP法檢測試劑盒，包含權利要求2的引物組。

5.權利要求4所述的試劑盒，使用該試劑盒中的各對引物進行PCR時，

PCR反應的反應體系為：

反應程序為：

其中X為各對引物的退火溫度，其分別為：

P73基因甲基化引物對58℃、P73基因非甲基化引物對58℃、P73基因啟動子區甲基化引物對64℃，P73基因啟動子區非甲基化引物對60℃。

6.使用權利要求4的試劑盒非診斷檢測P73基因及其啟動子區甲基化狀態的MSP方法，包括從樣品中提取DNA、重硫酸鹽處理DNA、使用權利要求4的試劑盒中的各對引物進行PCR反應、根據擴增片段的大小或有無確定樣品的P73基因及其啟動子區甲基化狀態。

7.權利要求6的方法，其中PCR反應的反應體系為：

反應程序為：

其中X為各對引物的退火溫度，其分別為：

P73基因甲基化引物對58℃、P73基因非甲基化引物對58℃、P73基因啟動子區甲基化引物對64℃，P73基因啟動子區非甲基化引物對60℃。