[發(fā)明專利](7S)?3,4?二甲氧基雙環(huán)并[4.2.0]辛?1,3,5?三烯?7?甲酸的酶合成方法以及在伊伐布雷定及其鹽的合成中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410054182.0
• 申請日: 2014-02-18
• 公開（公告）號: CN104017832B
• 公開（公告）日: 2017-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: S·佩德拉戈薩莫羅;F·勒富隆
• 申請（專利權(quán)）人: 瑟維爾實驗室
• 主分類號: C12P7/40
• 分類號: C12P7/40;C07C217/74;C07C213/02;C07D223/16
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所11247
• 代理人: 隋曉平,黃革生

1.合成光學(xué)純的式(I)化合物的方法：

該方法采用在另一種具有活性的生物學(xué)系統(tǒng)的微生物中過度表達(dá)的玫瑰色紅球菌NCIMB11216的腈水解酶通過外消旋的或非光學(xué)純的式(IV)的腈的對映選擇性酶水解進(jìn)行：

該反應(yīng)在有機(jī)溶劑和pH為5－10的水溶液的混合物中進(jìn)行，

每升溶劑混合物中式(IV)的腈的濃度為1－500g，

E/S的比例為1/1－1/100，

反應(yīng)溫度為25℃－40℃。

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述具有活性的生物學(xué)系統(tǒng)的微生物為包含重排質(zhì)粒的細(xì)菌。

3.權(quán)利要求2的方法，其中所述過度表達(dá)腈水解酶的細(xì)菌以細(xì)菌漿液或凍干物的形式直接使用。

4.權(quán)利要求1－3中任一項的方法，其中所述有機(jī)溶劑選自二甲基亞砜、DMF、丙酮、乙腈、乙醇、異丙醇、THF和MTBE。

5.權(quán)利要求1－4中任一項的方法，其中所述作為反應(yīng)副產(chǎn)物的構(gòu)型為(R)的腈：

通過堿的作用進(jìn)行外消旋化而形成外消旋的式(IV)的腈從而再循環(huán)進(jìn)入酶水解過程。

6.權(quán)利要求5的合成方法，其中所述堿為DBU。

7.權(quán)利要求5或權(quán)利要求6的合成方法，其中所述外消旋化步驟在位進(jìn)行。

8.權(quán)利要求5－7中任一項的方法，其中所述式(I)的酸在一或多個酶水解循環(huán)后分離。

9.合成式(III)化合物的方法：

采用式(IV)的腈作為原料：

將其水解形成光學(xué)純的權(quán)利要求1－8中任一項的式(I)的酸：

然后將其轉(zhuǎn)化為光學(xué)純的式(XI)的酰胺：

將其還原獲得式(III)化合物。

10.權(quán)利要求9的合成方法，其中所述將式(XI)化合物還原形成式(III)化合物的反應(yīng)通過BH₃、NaBH₄或LiAlH₄進(jìn)行。

11.權(quán)利要求9或權(quán)利要求10的合成方法，其中將式(III)化合物隨后與式(XII)化合物偶合：

其中X代表鹵素原子，

或者，在還原劑存在下，將其用式(XIII)化合物進(jìn)行還原胺化反應(yīng)：

其中R₂代表選自CHO和CHR₃R₄的基團(tuán)，

其中R₃和R₄每一個均代表直鏈或支鏈(C₁-C₆)烷氧基，或者與攜帶它們的碳一起形成1,3-二氧六環(huán)、1,3-二氧戊環(huán)或1,3-二氧庚環(huán)，

獲得伊伐布雷定，然后將其轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽，為無水或水合物形式。

12.權(quán)利要求11的合成方法，其中X為碘原子。

13.權(quán)利要求11的合成方法，其中式(III)化合物以其鹽酸鹽的形式用于還原胺化反應(yīng)，獲得為鹽酸鹽形式的伊伐布雷定。

14.權(quán)利要求10或權(quán)利要求13的合成方法，其中所述用式(XIII)化合物進(jìn)行的還原胺化反應(yīng)在鈀炭催化的氫氣環(huán)境中進(jìn)行。