[發明專利]一種藍莓組培擴繁及瓶外生根的方法

無效

• 申請號: 201410054055.0
• 申請日: 2014-02-18
• 公開（公告）號: CN103875529A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 申雪穎
• 申請（專利權）人: 杭州佑國生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州斯可睿專利事務所有限公司 33241
• 代理人: 林君勇

技術領域

本發明涉及一種工廠化育苗技術領域，尤其是涉及一種藍莓組培擴繁及瓶外生根的方法。

背景技術

藍莓（Vaccinium?spp.），杜鵑花科越橘屬。果實藍紫色，風味獨特，營養豐富。藍莓營養成分不僅限于果糖、纖維、維生素A和C，更重要的是富含抗氧化劑、細菌生長抑制劑、葉酸、花色素苷等化合物，對于人體內自由基的清除、抑制及逆轉人體衰老有密切關系，因此也被國際糧農組織列為人類五大健康食品之一。

藍莓不僅具有良好的國際、國內市場前景，而且在改變農林種植業結構，改善生態環境等方面可獨樹一幟，是能兼顧社會效益、經濟效益和生態效益的理想栽培果樹品種。我國于20世紀80年代初期開始引種栽培，目前的栽培地點從北到南發展迅速。

藍莓種苗繁殖的方法較多，如硬枝扦插、綠枝扦插、分株繁殖、種子繁殖、嫁接、組織培養等。目前，我國栽培的藍莓在生產上通常是以扦插繁殖為主。近年來，通過科研人員的不斷努力，以及對組織培養技術的深入研究，為各地探索出了一種能夠較為簡單快速的藍莓繁殖方法，組織培養工廠化育苗方法已廣泛應用于藍莓種苗繁育。這一技術的發展和應用，給藍莓生產提供了大量無毒優質的種苗，逐漸成為今后藍莓優質苗木生產的方向。但是在藍莓組織培養過程中采用瓶內生根技術存在許多問題，如：生根率低、生根周期長、生根程序復雜以及生根成本較高等，使藍莓快速工廠化育苗無法實現。

發明內容

本發明是提供一種藍莓組培擴繁及瓶外生根的方法，其主要是解決藍莓瓶內生根時生根率低、生根周期長、生根程序復雜以及生根成本較高等制約藍莓快速工廠化育苗的技術問題。

本發明的上述技術問題主要是通過下述技術方案得以解決的：

本發明的一種藍莓組培擴繁及瓶外生根的方法，其特征在于所述的方法包括：

a．外植體的選取與消毒：選擇生長健壯的無病蟲害植株，剪取半木質化枝條，除去葉片，流水下沖洗，在超凈工作臺上用酒精進行消毒，然后用無菌水沖洗2-3次，轉入氯化汞溶液中進行消毒，再用無菌水沖洗3-4次；

b．誘導側芽萌發：在超凈工作臺中將上一步得到的無菌材料接種到誘導側芽萌發的培養基中，培養基組分為：改良的WPM基本培養基+ZT0.8-2mg/L+白糖25-35g/L+瓊脂5-10g/L，pH調至5.4，其中改良的WPM基本培養是以水合硝酸鈣和硝酸鉀代替原有的硫酸鉀和氯化鈣；

c．增殖培養：將上一步得到的無菌側芽切成2-3cm的莖段轉入增殖培養基中繼代擴繁，增殖培養基配方組分為：改良的WPM基本培養基+ZT0.8-2mg/L+白糖25-35g/L+瓊脂5-10g/L，pH調至5.4；

d．瓶外生根：將上一步得到的8-10cm健壯無菌苗，打開瓶蓋，覆上濕毛巾在通風處煉苗2-3天，期間注意保持毛巾處于濕潤狀態，移栽馴化前對苗床和基質進行處理和消毒，基質采用國產一級水苔，消毒后水洗、甩干、粉碎，苗床的厚度4-6cm；將經過通風煉苗的健壯藍莓組培苗剪成3-4cm小段，扦插到上述苗床中，平均每株可剪成2-3段，扦插過程的每段需蘸取生根劑，扦插完成之后苗床覆膜，棚內相對濕度控制在60-80%，溫度控制在18-25℃，每隔2-3天噴一次水，此后每隔10天噴施一次花多多葉面肥，最后得到藍莓生根成品。

本發明采用改良的WPM基本培養基培養基，以水合硝酸鈣和硝酸鉀代替原有的硫酸鉀和氯化鈣，從而使藍莓在增殖培養過程中的增殖倍數提高了2-3倍，采用瓶外生根技術，減少了組培瓶內的生根過程，因而縮短了工廠化育苗的周期，降低了組培成本，同時提高了移栽煉苗的成活率，在瓶外生根過程中對每株組培苗采用剪段扦插的方式，與常規瓶內生根藍莓苗相比其增殖速率高出2-3倍，從而降低了移栽馴化的成本。

作為優選，所述的步驟a中氯化汞溶液的濃度為0.1%。

作為優選，所述的步驟d中基質的消毒需用濃度為1000倍的多菌靈消毒24小時。

作為優選，所述的生根劑為1.0mg/L?NAA。

具體實施方式

下面通過實施例，對本發明的技術方案作進一步具體的說明。

實施例1：本例的一種藍莓組培擴繁及瓶外生根的方法，其步驟為：

a．外植體的選取與消毒：選擇生長健壯的無病蟲害植物，剪取8-10cm半木質化枝條，除去葉片，流水下沖洗15-20分鐘，超凈工作臺內75%酒精消毒30s，然后無菌水沖洗2-3次，轉入0.1%升汞中消毒8分鐘，無菌水沖洗3-4次；