[發(fā)明專利]Au/Fe3O4免疫層析試紙條及其制備方法與應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410052944.3 | 申請(qǐng)日： | 2014-02-17 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN103823061A | 公開（公告）日： | 2014-05-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 謝芝勛;黃嬌玲;羅思思;謝志勤;謝麗基;劉加波;龐耀珊;范晴 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號(hào)： | G01N33/577 | 分類號(hào)： | G01N33/577;G01N33/531;G01N33/532 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢 |
| 地址： | 530001 廣西*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | au fe sub 免疫 層析 試紙 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種Au/Fe3O4免疫層析試紙條及其制備方法與應(yīng)用。?
背景技術(shù)
免疫層析技術(shù)是20世紀(jì)90年代初發(fā)展起來的一種新型免疫檢測技術(shù)，是把免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)移到了玻璃纖維和硝化纖維膜上進(jìn)行，不需要進(jìn)行結(jié)合標(biāo)記物與自由標(biāo)記物的分離。省去了繁瑣的加樣、洗滌步驟，因而操作簡單，快速（20分鐘內(nèi)出結(jié)果），人員不用培訓(xùn)，不需或僅需簡單的儀器，而且它保留了以前種種免疫檢測技術(shù)中抗體抗原反應(yīng)特異性的優(yōu)點(diǎn)，非常適合現(xiàn)場檢測，現(xiàn)在已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、畜牧獸醫(yī)、環(huán)境、食品監(jiān)管等各種檢測領(lǐng)域。?
在傳統(tǒng)的免疫層析系統(tǒng)中，用作可視或者被儀器檢測的指示物通常包括膠體金，磁珠，膠體硒，乳膠顆粒和量子點(diǎn)等物質(zhì)，其中以膠體金作為標(biāo)記的膠體金免疫層析試紙條和以磁性納米粒子作為標(biāo)記的磁性免疫層析試紙條倍受廣泛學(xué)者的青睞。因?yàn)槟z體金免疫層析試紙條在制備過程中，膠體金具有很好的生物相容性，易于標(biāo)記，在使用過程中具有快速，簡捷，單人份操作，但是缺點(diǎn)是只能實(shí)現(xiàn)半定量。因此一些研究工作者通過用磁珠代替膠體金作為標(biāo)記，構(gòu)建磁性免疫層析試紙條，并借助相關(guān)弱磁信號(hào)閱讀儀，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的定量快速檢測，并且在標(biāo)記過程中借助磁性分離架，可以實(shí)現(xiàn)快速分離洗滌，但是和膠體金試紙條做比較，磁性免疫層析試紙條的制備過程中，標(biāo)記過程十分繁瑣，需要對(duì)磁珠的表面進(jìn)行修飾。?
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種用于檢測待測病毒的Au/Fe3O4免疫層析試紙條。?
本發(fā)明提供的檢測待測病毒的Au/Fe3O4免疫層析試紙條，包括支持板和放置在其上的樣品墊、灌注有Au/Fe3O4標(biāo)抗體的偶聯(lián)墊、含有檢測線T和質(zhì)控線C的NC膜和吸水墊；?
所述Au/Fe3O4標(biāo)抗體為Au/Fe3O4納米粒子標(biāo)記待測病毒的抗體。?
Au/Fe3O4表示Au包裹在Fe3O4上。?
上述試紙條中，所述Au/Fe3O4納米粒子中的Fe3O4納米粒子的粒徑為40-50nm；?
所述待測病毒的抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。?
上述試紙條中，所述待測病毒的抗體為單克隆抗體；?
所述檢測線T由所述待測病毒的多克隆抗體形成；?
所述質(zhì)控線C由鼠源抗lgG抗體形成。?
上述試紙條中，所述鼠源抗lgG抗體為兔抗鼠lgG；?
所述待測病毒為禽流感病毒；?
所述禽流感病毒具體為H7亞型禽流感病毒。?
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備上述的試紙條的方法。?
本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟：?
1）先將標(biāo)記物Au/Fe3O4納米粒子懸濁液和待測病毒單克隆抗體混勻，反應(yīng)，收集固體反應(yīng)物，再將所述固體反應(yīng)物經(jīng)BSA封閉，即得到Au/Fe3O4標(biāo)抗體；?
在所述步驟1）的所述封閉后，還包括如下步驟：將所述封閉的產(chǎn)物收集沉淀，再溶解，得到Au/Fe3O4標(biāo)抗體。?
上述封閉采用的緩沖液為含有質(zhì)量百分含量為1%的BSA的20mmol/L硼酸鈉水溶液；?
所述溶解采用的緩沖液為含有1%BSA和0.1%疊氮鈉的20mmol/L的硼酸鈉水溶液。?
2）制備灌注有Au/Fe3O4標(biāo)抗體的偶聯(lián)墊和含有檢測線T和質(zhì)控線C的NC膜；?
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