[發明專利]一種不動桿菌及其菌劑的制備方法

有效

• 申請號: 201410052917.6
• 申請日: 2014-02-17
• 公開（公告）號: CN103756947A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 顏家保;許龍龍;楊洋;余永登;張浩;武文麗;陳佩;陳冬冬
• 申請（專利權）人: 武漢科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/16;C02F101/38;C02F101/34
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 張火春

技術領域

本發明屬于環境污染物生物脫氮技術領域。具體涉及一種不動桿菌及其菌劑的制備方法。

背景技術

近年來，為了提高廢水生物系統的處理能力，通過向系統中投加高效優勢菌種或通過基因工程產生的工程菌，即所謂的高效菌技術（生物強化技術）得到了迅速的發展，成為該領域的研究熱點。

在國外特別是發達國家，環境微生物菌劑更是受到人們的普遍關注和重視，已成為一種新的發展趨勢。丹麥的諾維信、美國Bioform公司所售的硝化菌均為復合菌劑，菌劑中含有大量的自養硝化菌，同時還含有一定數量的異養硝化好氧反硝化菌。硝化菌劑目前已經形成一定規模的產業，并已在發展中國家得到應用。與自養硝化菌相比，異養硝化細菌對培養條件的要求比較寬松，許多異養硝化細菌在低溫以及高C/N條件下仍能夠較好地進行硝化作用，適用的溶解氧和pH值范圍也更為寬泛。異養硝化好氧反硝化菌可以在同一反應器中，同時進行硝化和反硝化，有效降低廢水的總氮。含有異養硝化好氧反硝化菌的硝化菌劑，不僅可以提高富含有機成分廢水的硝化能力，同時還有較好的總氮脫除能力，從而為滿足更高環保要求的廢水排放標準提供菌劑保證。

目前文獻已報道了糞產堿菌(Alcaligenes?faecalis)、假單胞菌(Pseudomonas?stutzeri)、泛養硫球菌(Thiosphaera?pantotropha)具有較好的好氧反硝化能力，但對含酚廢水中氨氮的降解效率較低，致使難以在焦化、焦油加工等實際廢水處理中得到應用。

發明內容

本發明旨在解決普通異養硝化菌對含酚工業廢水中氨氮降解效率低的問題，目的是提供一種不動桿菌及其菌劑的制備方法，為焦化和焦油加工等實際廢水生物脫氮處理提供菌劑。

本發明所提供的不動桿菌（Acinetobacter?sp.）Y₃源于武鋼焦化公司廢水生物處理系統的活性污泥。該菌是以氨氮為氮源，以苯酚和丁二酸鈉為碳源和能源進行生長繁殖，利用硝化培養基進行馴化培養，并通過平板劃線分離純化得到。

其中，硝化培養基的成分是：丁二酸鈉為9.8g/L，磷酸氫二鈉為7.85g/L，磷酸二氫鉀為1.45g/L，硫酸鎂為0.2g/L，硫酸銨為1.0g/L，硫酸亞鐵為0.01g/L；硝化培養基的pH值用1mol/L的氫氧化鈉調至9.0。培養基滅菌條件是：溫度為121~126℃，時間為25min。

該菌為革蘭氏陰性，經16S?rDNA鑒定為不動桿菌（Acinetobacter?sp.），編號為Y₃。該菌于2013年9月25日保藏于中國典型微生物保藏中心（武漢大學），保藏編號為CCTCC?NO:M2013445。該菌菌落呈乳白色，圓形，中間凸起，表面光滑濕潤，邊緣整齊。具有同時硝化和反硝化能力，能以苯酚作為碳源和能源進行生長繁殖。

該菌較優的培養條件是：溫度為30℃，初始pH值為9.0，接種量為3?vol%，搖床轉速為150r/min，碳氮質量比（C︰N）為12︰1。

本發明還涉及所述不動桿菌（Acinetobacter?sp.）Y₃菌劑的制備方法：先向發酵罐裝入3/4體積的硝化培養基，用蒸汽在線滅菌；再將不動桿菌（Acinetobacter?sp.）Y₃接種到硝化培養基中發酵，發酵條件為：溫度為30℃，pH值為9.0，接種量為3vol%，轉速為150r/min，通氣量為0.5（V/V·min），發酵時間為24h，發酵過程中加入0.05?vol%的陶氏消泡劑。

由于采用上述技術方案，本發明與現有技術相比具有如下積極效果：

本發明提供的不動桿菌菌劑不但制備方法簡單，易于規?；a，而且降解效率高，環境適應能力強。所提供的不動桿菌（Acinetobacter?sp.）Y₃為異養硝化菌，能在大量有機物存在的條件下順利進行硝化反應，并能將硝化的產物同時進行反硝化，將氨氮和有機氮轉化為氮氣，無亞硝酸鹽氮積累。特別突出的優勢是，該菌能耐受酚濃度高達1000mg/L的工業廢水環境，并以苯酚作為碳源進行同時硝化和反硝化，實現廢水中的氨氮和苯酚的同時高效降解，在含酚工業廢水的生物脫氮處理中展現出良好的應用前景。

附圖說明

圖1為本發明的不動桿菌（Acinetobacter?sp.）Y₃的菌落圖；