[發明專利]一種新型雙啟動子結構單元

在審

• 申請號: 201410051605.3
• 申請日: 2014-02-14
• 公開（公告）號: CN104278032A
• 公開（公告）日: 2015-01-14
• 發明（設計）人: 陳亮;王加龍
• 申請（專利權）人: 上海美百瑞生物醫藥技術有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/79;C12N5/10;C12P21/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種新型雙啟動子結構單元，其包含2個核酸序列如SEQ?ID?NO.2所示的CMV啟動子和一段核酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的序列，該雙啟動子結構單元在經染色體整合后使得表達系統中目的基因的轉錄或表達增加。

2.如權利要求1所述的新型雙啟動子結構單元，其特征在于所述新型雙啟動子結構單元為SEQ?ID?NO.3、或與SEQ?ID?NO.3互補的核苷酸序列。

3.一種真核表達載體，其特征在于其包含如權利要求1或2所述的新型雙啟動子結構單元。

4.一種真核宿主細胞，其特征在于其包含如權利要求3所述的真核表達載體。

5.如權利要求4所述的真核宿主細胞，其特征在于所述宿主細胞為哺乳動物細胞。

6.如權利要求5所述的真核宿主細胞，其特征在于所述哺乳動物細胞為CHO、NSO、Sp2/0-Ag14、BHK21、BHK?TK′HaK、2254-62.2、V79、B14AF28-G3、或CHL細胞。

7.如權利要求6所述的真核宿主細胞，其特征在于所述CHO細胞為CHO-K1、CHO-DUKX，CHO-DUKX?B1、CHO-DG44、或CHO?Pro-5細胞。

8.一種形成經穩定轉染的高產真核宿主細胞系的方法，其包括下列步驟：

(a)將如權利要求1或2所述的新型雙啟動子結構單元整合至包含目的基因的真核表達載體中；(b)用此表達載體轉染真核宿主細胞；(c)選擇經轉染的高產宿主細胞。

9.一種制備重組蛋白藥物的方法，包含下列步驟：(a)將如權利要求1或2所述的新型雙啟動子結構單元整合至包含目的基因的真核表達載體中；(b)用此表達載體轉染真核宿主細胞；(c)選擇經轉染的高產宿主細胞；(d)在使得該一個或多個目的基因表達的條件下培養該所獲得的經轉染的高產宿主細胞；(e)收集并純化目的蛋白質。

10.權利要求1或2所述的新型雙啟動子結構單元在制備藥物或藥物組合物中的用途。