[發明專利]一種雞黃色羽相關的分子標記及其應用

在審

• 申請號: 201410050813.1
• 申請日: 2014-02-14
• 公開（公告）號: CN103898102A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 張細權;許繼國;聶慶華;吳海清
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種雞黃色羽相關的分子標記及其應用。

背景技術

雞的羽色是品種的重要特征之一，也是影響其經濟價值的一個重要指標。影響雞羽色的主要色素為黑色素，黑色素又可分為兩類，一類是真黑素，呈現褐色或黑色；另一類是嗜黑素，呈黃色或紅色。雞羽毛色素沉著取決于其所含真黑色素與嗜黑素的相對數量。雞的黑色素起始于胚胎的軀干神經脊細胞，在胚胎形成期間就開始分散遷移至真皮中定居，漸布于全身，多數黑色素細胞聚集于毛囊內（Kerje?et?al.,?2003）。

羽色是一個由眾多基因控制的極其復雜的性狀，許多位點在黑色素的生成和羽色表達過程中發揮重要作用，其中一個非常重要的位點是擴展位點（Extension），該位點影響黑色色素（真黑素）和紅色色素（嗜黑素）的相對分布。在幾種哺乳動物中以及雞上的研究顯示E位點編碼黑素皮質激素受體1基因（MC1R）（Robbins?et?al.,?1993;?Jackson?et?al.,?1994;?Kerje?et?al.,?2003），MC1R在兩種類型的黑色素生成中起著關鍵的作用。

黑色素的生成過程中MC1R基因需要與兩個配體α-促黑素細胞激素（α-MSH）和促腎上腺皮質激素（ACTH）共同作用，它們與黑色素細胞膜上的MC1R基因結合后，使與受體偶聯的G蛋白由無活性的二磷酸鳥苷（CDP）型轉變為有活性的三磷酸鳥苷（GTP）型，激活膜上的腺苷酸環化酶系統，三磷酸腺苷（ATP）?轉變為環腺苷酸（cAMP），cAMP進一步激活酪氨酸激酶，活化酪氨酸酶TYR。TYR催化黑色素細胞內的酪氨酸生成多巴，多巴在黑素體內聚積到一定的量后，釋放黑色素，如果細胞中的TYR過量，多巴及多巴醌將通過各自的通道合成真黑色素；如果黑素細胞中的TYR過少，酪氨酸則轉化為半胱氨酰多巴，從而導致嗜黑素的廣泛表達（于云柱等，2010）。如果MC1R基因發生變異可能導致機體不能合成真黑色素，使雞的羽毛顏色表現為黃色或紅色。

廣東、廣西及港澳地區偏好具有“三黃”特征的優質肉雞，其中一個特征就是黃羽。在優質黃羽肉雞的選育中，傳統的育種方法是根據雜交后代雞的表型性狀留種，進行測交檢測，繁殖擴群等步驟，但由于羽色是一個多基因控制的性狀，在此過程中容易出現性狀分離，且選擇進程緩慢。因此，建立一種快速鑒別雞黃色羽相關基因型的分子方法，可大大縮短育種時間，加速黃色羽肉雞的選育進程，節約生產成本。

發明內容

本發明要解決的技術問題是為了克服現有技術中缺乏快速鑒別雞黃色羽相關基因型的方法的缺陷，提供一種雞黃色羽相關的分子標記。

?本發明的另一個目的在于提供一種利用雞黃色羽相關分子標記快速鑒別雞黃色羽相關基因型的方法。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現：

一種雞黃色羽相關的分子標記，所述分子標記為SEQ?ID?NO:1所示序列中的第883處的A/G堿基突變。

一種利用雞黃色羽相關分子標記快速鑒別雞黃色羽相關基因型的方法，包括如下步驟：

S1.以雞MC1R基因的DNA序列為參考，設計如下引物并進行PCR擴增：

正向引物F：5'?—ATCCCAAGGTACACAGTGAC—?3'，

反向引物R：5'?—GGGCACCCAGGGGACACC—?3'。

S2.將所得擴增產物直接測序，?

若基因型為GG型，則該個體為黃色羽純合子；

若基因型為AG型，則該個體為黃色羽雜合子；

若基因型為AA型，則該個體為野生型，即非黃色羽純合子。

上述分子標記在雞黃色羽性狀輔助選擇中的應用。

本發明的有益效果是：可以準確的判定個體為黃色羽是純合子還是雜合子。提高雞群羽色的一致性。

附圖說明

圖1是通過PCR獲得的10個品種雞MC1R基因上的部分DNA序列，用來尋找分子標記的片段的電泳圖片，瓊脂糖凝膠濃度為1.5%。

圖2是對上述10個品種黃羽和非黃羽雞MC1R基因部分DNA序列進行對比的結果。

具體實施方式

下面結合說明書附圖和具體實施例對本發明作進一步的說明，但本發明保護的范圍并不局限于此。

實施例1

S1.引物設計