[發明專利]一種紅星茵芋離體快速繁殖的方法

有效

• 申請號: 201410050810.8
• 申請日: 2014-02-14
• 公開（公告）號: CN104335898A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 李其友;陽永學;曾紅霞;肖康飛;祝菊紅;程維舜;張娜;楊皓瓊;畢秋榮
• 申請（專利權）人: 武漢市農業科學研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

技術領域

本發明涉及植物生物技術領域，更具體涉及一種紅星茵芋離體快速繁殖的方法。?

背景技術

紅星茵芋(Skimmia?japonica?Rubella),又名紅玉珠，屬蕓香科茵芋屬植物，是近年頗受歡迎的高檔觀賞花卉之一。紅星茵芋葉片翠綠光亮，初夏的紅褐色花蕾玲瓏可愛，花香濃郁；秋冬季節紅星滿枝，鮮艷欲滴，掛果期可長達半年以上，是觀葉、觀花、觀果俱佳的優良花卉品種（吳棣飛，年宵觀果佳卉一紅星菌芋。中國花卉盆景，2007,(2):5-5）。?

紅星茵芋可播種和扦插進行繁殖，采用種子繁殖，后代會出現分離，不能保持母株的優良特性，而且從播種至開花所需周期較長，現在生產上很少采用。扦插繁殖成活率不到20%，而且需要大量的母本，遠遠不能滿足生產需求，而且長期營養繁殖易出現品種退化現象。若從荷蘭進口，高10cm小苗每株10元以上（孟艷瓊，李仁杰，伊興凱，梅俊，李靜雅，紅星茵芋離體花梗腋芽誘導及叢生芽增殖研究。中國農學通報，2007,23（11）：81-85），種苗價格昂貴，導致企業生產成本增加。采用植物組織培養技術，工廠化生產紅星茵芋種苗，不僅可以克服播種和扦插帶來的品種混雜、種性退化等問題，而且可以不受自然氣候的影響全年生長優質種苗，為紅星茵芋的育種研究提供材料和技術支持，對推動紅星茵芋產業的快速發展具有重要意義。?

目前，關于紅星茵芋的組培快繁僅有一篇報道，孟艷瓊等（2007）采用紅星茵芋的花梗為外植體，在MS+2,4-D0.3mg/L+IAA0.2mg/L+BA3.0mg/L+KT2.0mg/L培養基誘導花梗腋芽萌發，誘導率可達91.1%。在MS+NAA0.8mg/L+BA3.0mg/L+KT2.0mg/L上繼代增殖，增殖系數可達8.73（孟艷瓊，李仁杰，伊興凱，梅俊，李靜雅，紅星茵芋離體花梗腋芽誘導及叢生芽增殖研究。中國農學通報，2007,23（11）：81-85）。由于紅星茵芋開花受時間限制，采用花梗取材有限，且實驗中沒有進行生根培養方面的試驗，在實際工廠育苗中受到限制。?

發明內容

本發明的目的是在于提供了一種紅星茵芋離體快速繁殖的方法，該方法簡便易行，繁殖系數大，生產成本低，周期短，平均繁殖系數達4.5，繁殖周期20～25d，生根率90％左右，移栽成活率95％。采用種子無菌萌發的芽苗，在人為可控條件下進行組培苗的工廠化生產，不受自然條件的影響，操作簡便，繁殖系數高，生產成本低，周期短，為紅星茵芋種苗產業化生產奠定了基礎。?

為了達到上述的目的，本發明采用以下技術措施：?

（1）外植體選擇和消毒：?

以紅星茵芋成熟種子為外植體，流水下沖洗30min，將其用70%（體積比）酒精消毒后，再用濃度為0.1%（質量體積比）氯化汞（HgCl₂）消毒8～10min，然后用無菌水沖洗4次。?

（2）種子萌發：?

將消毒好的種子接入萌發培養基中，在溫度為24－26℃、濕度為35－45%，光照強度3000～5000μmol?m^-2s^-1，每天光照14～16h，經過25～30d培養，種子萌發長出子葉，經過15～20d后，長出1～2片真葉。?

所述的種子萌發培養基包括MS基本培養基+0.5mg/L?GA₃+蔗糖30g/L，PH值為5.8～6.0。?

（3）叢芽誘導與增殖：?

切取1～2片真葉及以上的頂芽，接種到叢芽誘導培養基上，在溫度為24－26℃、濕度為35－45%，光照強度3000～5000μmol?m^-2s^-1，每天光照14～16h，經過25～30d培養，獲得叢生芽。挑選正常發育的叢生莖芽，每隔20～25d切割成1-2個莖芽進行繼代培養，平均每次繼代1瓶可轉接4-5瓶，使叢芽不斷增殖。?

所述的叢芽誘導和增殖培養基包括MS基本培養基+1.0～1.5mg/L6-BA+0.1～0.3mg/L?NAA+0.5mg/L?GA₃+蔗糖30g/L，PH值為5.8～6.0。?

（4）生根培養：?

將株高3～5cm長的試管苗，接種到生根培養基中，在溫度為24－26℃、濕度為35－45%，光照強度3000～5000μmol?m^-2s^-1，每天光照14-16h，經過14－16d幼苗就會分化出4～6條白色不定根。?