[發(fā)明專利]一種來源于籃子魚的Δ4脂肪酸去飽和酶及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410048201.9
• 申請日: 2014-02-12
• 公開（公告）號: CN103820403A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱貴明;王淑秋;王迪迪;孫潔;葛堂棟;樸金花;江旭東
• 申請（專利權(quán)）人: 佳木斯大學(xué)
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12N15/53;C12N15/85;C12N5/10;C12P7/64
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;陳曉慶

1.一種蛋白，為如下（1）或（2）所示：

（1）SEQ?ID?No.2所示的蛋白；

（2）將SEQ?ID?No.2所示的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白質(zhì)。

2.權(quán)利要求1所述蛋白的編碼基因。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因為如下中至少一種：

1）SEQ?ID?No.1中自5’末端起第10位至第1347位核苷酸所示的DNA分子；

2）在嚴格條件下與1）限定的DNA分子雜交且編碼權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)的DNA分子；

3）與1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且編碼權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)的DNA分子。

4.含有權(quán)利要求2或3所述編碼基因的重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌。

5.一種蛋白組合物，由SEQ?ID?No.2所示的蛋白和SEQ?ID?No.4所示的蛋白組成。

6.一種蛋白組合物，由SEQ?ID?No.2所示的蛋白、SEQ?ID?No.6所示的蛋白和SEQ?ID?No.8所示的蛋白組成。

7.一種提高哺乳動物細胞中DHA（22:6n-3）合成能力的方法，包括如下步驟：將權(quán)利要求1所述蛋白的編碼基因?qū)氲匠霭l(fā)細胞中，得到轉(zhuǎn)基因細胞；與出發(fā)細胞相比，轉(zhuǎn)基因細胞的DHA（22:6n-3）合成能力提高。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述編碼基因是通過重組表達載體導(dǎo)入的，所述重組表達載體是將所述編碼基因插入出發(fā)載體pcDNA3.1(-)的多克隆位點得到的。

9.權(quán)利要求1所述的蛋白在制備促進DHA（22:6n-3）合成的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

或，

權(quán)利要求5或6所述的蛋白組合物在制備促進DHA（22:6n-3）合成的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1所述的蛋白在制備促進DPA(22:5n-3)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

或,

權(quán)利要求5或6所述的蛋白組合物在制備促進DPA(22:5n-3)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

或，

權(quán)利要求1所述的蛋白在制備促進△15脂肪酸去飽和酶將DPA(22:5n-3)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

或，

權(quán)利要求1所述的蛋白在制備促進△15脂肪酸去飽和酶將LA(18:2n-6)和/或ARA(20:4n-6)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

權(quán)利要求5所述的蛋白組合物在制備促進LA(18:2n-6)和/或ARA(20:4n-6)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

所述△15脂肪酸去飽和酶的氨基酸序列如SEQ?ID?No.4所示；

或，

權(quán)利要求1所述的蛋白在制備促進Δ6-脂肪酸去飽和酶和Δ5-脂肪酸去飽和酶將DPA(22:5n-3)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

或，

權(quán)利要求1所述的蛋白在制備促進Δ6-脂肪酸去飽和酶和Δ5-脂肪酸去飽和酶將LA(18:2n-6)和/或ALA(18:3n-3)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

權(quán)利要求6所述的蛋白組合物在制備促進LA(18:2n-6)和/或ALA(18:3n-3)轉(zhuǎn)化成DHA(22:6n-3)的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

所述Δ6-脂肪酸去飽和酶的氨基酸序列如SEQ?ID?No.6所示；

所述Δ5-脂肪酸去飽和酶的氨基酸序列如SEQ?ID?No.8所示。