[發明專利]一種以水蛭素為融合伴侶制備重組小分子蛋白或多肽的方法無效
| 申請號: | 201410048157.1 | 申請日: | 2014-02-12 |
| 公開(公告)號: | CN103819546A | 公開(公告)日: | 2014-05-28 |
| 發明(設計)人: | 譚樹華;張萍;代廣知;徐振雷 | 申請(專利權)人: | 中國藥科大學 |
| 主分類號: | C07K14/415 | 分類號: | C07K14/415 |
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| 地址: | 211198 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 水蛭 融合 伴侶 制備 重組 分子 蛋白 多肽 方法 | ||
1.一種融合表達小分子蛋白(多肽)的方法,其技術特征是:以水蛭素為融合伴侶(標簽),將小分子目的蛋白(多肽)拼接于水蛭素融合伴侶下游進行融合表達。
2.根據權利要求1所述的融合表達方法,在融合伴侶(標簽)水蛭素與目的小分子蛋白(多肽)之間可以設計一個連接肽,該連接肽中包含1個或1個以上的蛋白酶切位點(如腸激酶切割位點)或化學切割位點或可以自己切割的蛋白內含子(intein),這樣可以在表達后對融合蛋白進行酶切或化學切割或誘導自切割以釋放出目的蛋白(多肽)。
3.根據權利要求1所述的融合表達方法,由于水蛭素融合伴侶(標簽)分子量較小(約7Kd),這樣可以有效增加小分子目的蛋白(多肽)在融合蛋白中所占的比率,從而最終提高目的小分子蛋白(多肽)的產量。
4.根據權利要求1所述的融合表達方法,水蛭素作為融合伴侶(標簽)與目的小分子蛋白(多肽)融合后仍具有抗凝活性,這樣可以通過測定融合蛋白的抗凝活性方便快捷地對融合蛋白的表達和純化進行實時檢測與追蹤。
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