[發(fā)明專利]寡肽CD14及其制備方法和應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410044233.1
• 申請日: 2014-01-30
• 公開（公告）號: CN104817623A
• 公開（公告）日: 2015-08-05
• 發(fā)明（設計）人: 陳光健
• 申請（專利權）人: 陳光健
• 主分類號: C07K5/097
• 分類號: C07K5/097;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/06;A61P29/00;A61P17/02;A61P1/04;A61P37/04;A23L1/305
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1.一種寡肽CD14，其特征在于，由H?、L、Y?3個氨基酸殘基組成，分子量為431.50?Da，其氨基酸序列如SEQ?ID:1?所示。

2.一種權利要求1所述寡肽的制備方法，其特征在于包括如下的步驟：

a.合成順序為從C端到N端;取1倍摩爾當量的樹脂放入多肽合成儀反應器中，加入DCM(二氯甲烷)溶脹半小時，然后抽掉DCM，加入序列中第一個Fmoc保護的氨基酸10mmol，2倍摩爾當量的DIEA(二異丙基乙胺)，適量的DMF(二甲基甲酰胺)、DCM溶液（適量是指以可使樹脂充分鼓動起來為宜），用氮氣鼓泡反應60min；然后加入約5倍摩爾當量甲醇，反應半小時，抽掉反應液，用DMF、甲醇洗凈;

b.加入適量哌啶去除Fmoc（9-芴甲氧羰基）保護基，洗凈，茚三酮檢測；

c.往反應器中加入序列中第二個氨基酸（也為2倍摩爾當量），2倍摩爾當量HBTU（苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽）及DIEA，氮氣鼓泡反應半小時，抽掉液體，用DMF,甲醇洗凈，茚三酮檢測;

d.重復依步驟b、c的方式依次加入序列中氨基酸，抽掉液體，用DMF洗凈，茚三酮檢測;

e.將樹脂用氮氣吹干后，從反應柱中取下并稱取重量，倒入燒瓶中，然后往燒瓶中加一定量的95%TFA（三氟乙酸）切割液，震蕩反應2?h，目的是將多肽從樹脂載體上裂解下來并去除氨基酸的側鏈保護基團；

f.濾掉樹脂，得到濾液，然后向濾液中加入大量乙醚，析出粗產物，然后離心，清洗即可得到該序列的粗產物；

g.分析提純和質譜檢測：用ESI（電噴霧電離）離子源質譜儀檢測該序列分子量的正確性，用高效液相色譜將粗品提純至要求純度；

h.收集純化好的目標寡肽溶液放入凍干機中進行濃縮，凍干成白色粉末。

3.一種如權利要求1?所述的寡肽在制備抗炎或鎮(zhèn)痛藥物中的應用。

4.一種如權利要求1?所述的寡肽在制備修復創(chuàng)面藥物中的應用。

5.一種如權利要求1?所述的寡肽在制備治療皮膚外傷藥物中的應用。

6.一種如權利要求1?所述的寡肽在制備治療消化道潰瘍藥物中的應用。

7.一種如權利要求1?所述的寡肽在制備提高免疫藥物中的應用。

8.權利要求1所述的寡肽可作為普通食品、保健品或者藥品的組成部分。

9.含有權利要求1所述的一種或多種寡肽的組合物，其中含有藥學可以接受的載體。

10.權利要求9所述的組合物可以以藥物制劑形式存在，優(yōu)選的是注射劑，更優(yōu)選的是冷凍干燥注射劑，該藥物制劑形式藥物組合物，可以按照制劑學常規(guī)技術制備，包括將藥物活性成分，本發(fā)明的寡肽與藥物載體混合，按照制劑學常規(guī)技術制成所需要的劑型。