[發(fā)明專利]一種表面等離子體共振免疫傳感芯片及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410040559.7
• 申請日: 2014-01-27
• 公開（公告）號: CN103792368A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李瑩;鐘金鋼;馬驍;齊攀
• 申請（專利權(quán)）人: 暨南大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N21/552
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運(yùn)貞;陳燕嫻

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物芯片領(lǐng)域，具體涉及一種表面等離子體共振免疫傳感芯片及其制備方法與應(yīng)用。?

背景技術(shù)

二十世紀(jì)九十年代，人類基因組計劃(Human?Genome?Project，HGP)和分子生物學(xué)相關(guān)學(xué)科的發(fā)展為生物芯片、基因芯片技術(shù)的出現(xiàn)和發(fā)展提供了有利條件。生物芯片（biochip）是根據(jù)生物分子間特異相互作用的原理，將生化分析過程固著于芯片表面，從而實(shí)現(xiàn)對DNA、RNA、多肽、蛋白質(zhì)以及其他生物成分的高通量快速檢測。蛋白質(zhì)芯片(protein?chip)是將蛋白質(zhì)或抗原等一些非核酸生命物質(zhì)固定在微型載體上獲得，芯片上的探針構(gòu)成為蛋白質(zhì)或芯片作用對象為蛋白質(zhì)者統(tǒng)稱為蛋白質(zhì)芯片。?

盡管生物芯片技術(shù)已經(jīng)取得了長足的發(fā)展，得到世人的矚目，但仍然存在著許多問題，例如技術(shù)成本昂貴、操作復(fù)雜、重復(fù)性差、分析范圍較狹窄、通常需要放射性元素標(biāo)記或者熒光標(biāo)記等。這些問題主要表現(xiàn)在樣品的制備、探針合成與固定、分子的標(biāo)記、數(shù)據(jù)的讀取與分析等方面。熒光法是目前使用最多的標(biāo)記方法，靈敏度不高，需要避光，用于檢測結(jié)果的激光掃描儀價格昂貴。同位素標(biāo)記法需要同位素和放射自顯影，使用不便，操作復(fù)雜，耗時，有嚴(yán)重的污染。本發(fā)明不需要標(biāo)記，可解決熒光標(biāo)記和放射性元素標(biāo)記對環(huán)境有污染的問題，同時樣品處理簡單，檢測時間短，操作簡便。?

全世界約有30%～40%的人患有各種各樣的過敏疾病。食品過敏反應(yīng)是機(jī)體受同一抗原再次刺激后，表現(xiàn)為組織損傷或生理功能紊亂的特異性免疫反應(yīng)，臨床表現(xiàn)包括蕁麻疹、皰疹樣皮炎、口腔過敏綜合癥、腸病綜合癥、哮喘及過敏性鼻炎等，甚至?xí)疬^敏性休克，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。食物過敏是涉及食品安全的重要問題，海產(chǎn)品是其中重要的一類。蝦及其制品味道鮮美，營養(yǎng)豐富，但具有較高的致敏性，是聯(lián)合國糧農(nóng)組織公布的八大類過敏食物之一，過敏病人中約有20%對蝦過敏，小兒發(fā)病率高達(dá)60%，嚴(yán)重影響人們的生?活質(zhì)量。世界各地都出產(chǎn)蝦，產(chǎn)量豐富，隨著水產(chǎn)品貿(mào)易的全球化，水產(chǎn)品的過敏原問題受到廣泛關(guān)注，美國食品藥品管理局（FDA）、歐洲食品安全局（EFSA）、日本和中國香港都先后針對食品中的過敏原成分制定了相應(yīng)的法規(guī)。很多國家對進(jìn)口食品過敏原標(biāo)簽的要求越來越嚴(yán)格，食品中過敏原的檢測已成為新的食品國際貿(mào)易技術(shù)壁壘。因此食品中過敏原的檢測與安全評價已成為食品安全研究領(lǐng)域一個重要的課題。因此，蝦過敏原的檢測、過敏反應(yīng)的研究、抗過敏藥物的研制是急需研究的課題。為現(xiàn)場檢測食品中蝦過敏原、檢測臨床上血清中蝦過敏原，研究特異、靈敏、快捷地的方法意義重大。?

過敏原(anaphylactogen)又稱為變應(yīng)原，是能誘導(dǎo)I型超敏反應(yīng)的抗原；過敏反應(yīng)，又稱變態(tài)反應(yīng)，是異常、有害、病理性的免疫反應(yīng)。蝦過敏屬于I型過敏反應(yīng)，其機(jī)理是過敏原進(jìn)入機(jī)體后，誘發(fā)能合成IgE的B細(xì)胞產(chǎn)生特異性IgE，IgE與肥大細(xì)胞、嗜堿性顆粒細(xì)胞結(jié)合成為致敏靶細(xì)胞。IgE一旦與靶細(xì)胞結(jié)合，機(jī)體就會呈現(xiàn)致敏狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體再次接觸同樣的過敏原刺激時，再次進(jìn)入的相同過敏原與已經(jīng)結(jié)合的靶細(xì)胞上的IgE結(jié)合發(fā)生特異性反應(yīng)，引起水腫、哮喘、蕁麻疹、腹瀉等過敏癥狀，伴隨著患者血清IgE水平升高。目前國內(nèi)對過敏性疾病的實(shí)驗診斷，主要采用過敏原檢測和特異性IgE、IgG檢測法，檢測試劑主要依賴進(jìn)口，檢測費(fèi)用較高。同時，食品中過敏原的檢測與安全評價是食品安全領(lǐng)域的重要課題。?

目前，過敏原的檢測主要是酶聯(lián)免疫吸附測定法（Enzyme?linked?immunosorbent?assay，ELISA），該方法靈敏度高，但是檢測過程復(fù)雜，使用的熒光標(biāo)記物污染環(huán)境，儀器價格昂貴，在實(shí)際應(yīng)用中受到限制。表面等離子體共振生物芯片不需要標(biāo)記，可對分子間的相互作用進(jìn)行實(shí)時檢測，已被廣泛用于藥物分析、食品分析、環(huán)境監(jiān)測等許多領(lǐng)域。?