[發(fā)明專利]天川顆粒中間產(chǎn)品特征指紋圖譜構(gòu)建方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410040492.7
• 申請(qǐng)日: 2014-01-27
• 公開（公告）號(hào): CN103760287A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔美蘭;婁紅祥;馮波;李潔;于黎鑫;常征;王艷敏;王水蓮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東齊都藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 青島發(fā)思特專利商標(biāo)代理有限公司 37212
• 代理人: 馬俊榮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用高效液相色譜方法建立天川顆粒中間產(chǎn)品的HPLC-UV標(biāo)準(zhǔn)特征指紋圖譜，對(duì)天川顆粒生產(chǎn)過程中間產(chǎn)品水提濃縮液的質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控，屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域。背景技術(shù)

中風(fēng)病是中老年人常見病、多發(fā)病，是老年人三大死因之一，具有發(fā)病、致殘、死亡和復(fù)發(fā)率四高的特點(diǎn)，是威脅中老年人身體健康的主要疾病。近年來，全國(guó)、全世界發(fā)病率有增高趨勢(shì)，心腦血管疾病已上升為死亡原因首位，全國(guó)每年大約有100萬人罹患中風(fēng)疾病，急性后期，往往遺留有諸多的后遺癥，如偏癱、癡呆、失語等，對(duì)病人及家庭和社會(huì)造成極大的痛苦和負(fù)擔(dān)。遺留的后遺癥，每年大約需治療3～6個(gè)月。因此，在深入探討風(fēng)痰瘀血、痹阻脈絡(luò)在中風(fēng)病發(fā)病機(jī)理中的重要地位的基礎(chǔ)上，擬平肝熄風(fēng)、祛痰化瘀、活血通絡(luò)之法，用天麻、川芎、懷牛膝和野葛根合理組方。根據(jù)《中藥、天然藥物注冊(cè)分類及申報(bào)資料要求》的規(guī)定，開發(fā)成療效可靠、服用方便、便于攜帶的天川顆粒。

研究表明，天麻具有抗驚厥，鎮(zhèn)痛，改善微循環(huán)，抗缺血、缺氧和抗炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等作用。其主要提取物天麻素具有鎮(zhèn)靜、抗驚厥、抗癲癇、鎮(zhèn)痛，增加腦血流量，改善椎基底動(dòng)脈、小腦前下動(dòng)脈、小腦后下動(dòng)脈、迷路動(dòng)脈及內(nèi)耳供血不足，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，促進(jìn)心肌細(xì)胞能量代謝的功能。葛根可以明顯降低血壓，減緩心率，降低心肌耗氧量，改善心肌代謝，抗心肌缺血，縮心肌梗死范圍，可以顯著擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，改善微循環(huán)，還可以降低血脂和血糖。其提取物葛根素、葛根總黃酮等，可以明顯擴(kuò)張冠狀血管，改善缺血區(qū)的心肌血供；可以抗血小板聚集，防治動(dòng)脈粥樣硬化，改善微循環(huán)，并通過影響細(xì)胞膜對(duì)K⁺、Na⁺、Ca⁺的通透性及影響兒茶酚胺釋放，降低心肌興奮性而發(fā)揮抗心律失常作用。

申請(qǐng)人對(duì)該天川顆粒，有一個(gè)在先申請(qǐng)，專利號(hào)CN200410036481.8；本申請(qǐng)是對(duì)該天川顆粒質(zhì)量精制方法的進(jìn)一步探索研究。

中藥指紋圖譜是指某種中藥材或中成藥中所共有的、具有特征性的某類或數(shù)類成分的色譜或光譜的圖譜。中藥指紋圖譜能比較全面地反映中藥中化學(xué)物質(zhì)的種類和數(shù)量，是實(shí)現(xiàn)中藥真實(shí)性、質(zhì)量可控性和產(chǎn)品穩(wěn)定性的可行模式，能更好地反映中藥的內(nèi)在品質(zhì)。隨著中藥指紋圖譜及化學(xué)模式識(shí)別技術(shù)的發(fā)展，指紋圖譜技術(shù)已日益成為國(guó)內(nèi)外廣泛接受的中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)模式。基于定量指紋圖譜技術(shù)的中藥質(zhì)量控制模式是以傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論體系為基礎(chǔ)的綜合控制模式，體現(xiàn)了中醫(yī)藥整體治療的特色。定量指紋圖譜技術(shù)在原有指紋圖譜的方法上賦予指紋圖譜大量的定性、定量信息共同應(yīng)用于中藥質(zhì)量控制，對(duì)指紋圖譜中多個(gè)目標(biāo)成分尤其是有效成分進(jìn)行準(zhǔn)確定量，使中藥尤其中藥復(fù)方制劑質(zhì)量控制更加準(zhǔn)確，能更真實(shí)反映中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量狀況和產(chǎn)品組成，產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性更加可靠。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種天川顆粒的中間產(chǎn)品水提液特征指紋圖譜的建立方法，以及由此方法得到的天川顆粒中間產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)特征指紋圖譜。本發(fā)明通過對(duì)天川顆粒中間產(chǎn)品水提液高效液相色譜指紋圖譜的研究，提供了一種較好的質(zhì)量控制方法，是天川顆粒及其中間產(chǎn)品水提液的質(zhì)量控制更加完善和科學(xué)。

本申請(qǐng)所述的“天川顆粒中間產(chǎn)品”，是指按照申請(qǐng)人的在先申請(qǐng)CN200410036481.8規(guī)定的配量和制備方法，在制備天川顆粒過程中的醇沉前的藥材混合水煎煮濃縮液。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)解決方案為：

1.研制一種天川顆粒中間產(chǎn)品指紋圖譜的建立方法，其特征是采用HPLC-UV法，包括如下步驟：

（1）供試品溶液的制備：取天川顆粒中間產(chǎn)品密度為0.50～1.50g/ml水提濃縮液適量，精密量取，加水1～100倍稀釋，混勻后，取少量上清液過0.45μm微孔濾膜濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液；

（2）對(duì)照品溶液的制備：精密稱取天麻素、對(duì)羥基苯甲醇、鹽酸川芎嗪、對(duì)羥基苯甲醛、葛根素、大豆苷、阿魏酸、β-蛻皮甾酮、大豆苷元適量，分別用純化水、純化水、70%甲醇、純化水、純化水、甲醇、70%甲醇、甲醇、甲醇溶解成濃度分別為1mg/ml的溶液，再吸取對(duì)照品溶液各適量，用純化水稀釋成濃度分別為0.05μg/ml的對(duì)照品溶液；

（3）色譜條件：色譜柱為5μm?Fortis-C₁₈，250×4.6mm：流動(dòng)相為0.085%磷酸水溶液-甲醇；采用梯度洗脫方式0min→15min→17min→57min→70min→90min→95min，甲醇5%→10%→20%→40%→60%→70%→100%；流速0.5～1.5ml/min；柱溫25～35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm；進(jìn)樣量為10～100μl；