[發明專利]一種提高高雄山蟲草體表侵染家蠶產子實體率的方法

有效

• 申請號: 201410037117.7
• 申請日: 2014-01-26
• 公開（公告）號: CN103865801A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 梁建東;韓燕峰;梁宗琦;王玉榮;杜文
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01K67/04;C12R1/645
• 代理公司: 貴陽東圣專利商標事務有限公司 52002
• 代理人: 袁慶云

1.一種提高高雄山蟲草體表侵染家蠶產子實體率的方法，包括以下步驟：

（1）高雄山蟲草GZUIFR-PT211菌絲段接種液的制備：

在PDA培養基上活化高雄山蟲草GZUIFR-PT211菌種，然后將活化好的菌種接種到液體種子培養基中，搖床常規培養3-4天后即可備用；制備菌絲段接種液：使用菌絲段生產培養基，接種量20ml/l，搖床轉速為200?r/min，26℃下培養96h，將培養好的發酵液用滅菌的雙層濾紙過濾即得到高雄山蟲草GZUIFR-PT211的菌絲段接種液；

（2）體表侵染及子實體的人工培養

選取大小均一的蠶蛹，用5%的聚維酮碘液擦涂或噴施于蠶蛹體表，作用5min后用無菌水漂洗3次，再用1mol/l?NaOH擦涂或噴施于蠶蛹體表，作用5min后用無菌水漂洗3次，瀝干水分后，取蠶蛹浸蘸濃度大于10⁶個菌絲段/ml的高雄山蟲草GZUIFR-PT211菌絲段溶液，而后置于用濾紙加無菌水保濕的容器內，在20-23℃培養，3-5天后大部蠶蛹變硬，再保濕培養3-5天后從蛹體的節間先長出菌絲體和很細小的子實體，此時將感染的蠶蛹放入較大容器，進行12h見光培養，12h暗培養，在暗培養階段降低培養溫度5℃培養，在侵染20-25天時已生長旺盛，到25-30天時子實體大部分表面披一層白色的孢子粉，此時，子實體已經成熟。

2.如權利要求1所述的一種提高高雄山蟲草體表侵染家蠶產子實體率的方法，其中：第（1）步中的液體種子培養基為常規馬鈴薯培養基。

3.如權利要求1或2所述的一種提高高雄山蟲草體表侵染家蠶產子實體率的方法，其中：第（1）步中的生產培養基配方為：葡萄糖為32.83g/l，硝酸銨為3.19g/l，K₂HPO₄?1g/l，KCl?0.5?g/l，CaCl₂?0.5?g/l，FeSO₄?0.01?g/l，初始pH為6。

4.如權利要求3所述的一種提高高雄山蟲草體表侵染家蠶產子實體率的方法，其中：高雄山蟲草GZUIFR-PT211，保藏號：CCTCC?No：M?2011217。