[發(fā)明專利]一種利用玉米芯纖維素發(fā)酵制備富馬酸發(fā)酵液的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410036170.5
• 申請(qǐng)日: 2014-01-24
• 公開（公告）號(hào): CN103789360A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李興江;李碩;姜紹通;潘麗軍;吳悅;劉亞;孫婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 合肥工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P7/46
• 分類號(hào): C12P7/46;C12R1/845
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種利用玉米芯纖維素發(fā)酵制備富馬酸發(fā)酵液的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將干燥玉米芯粉碎至40目后與堿性雙氧水溶液按質(zhì)量體積比1g：（1～15）mL混合，在85℃～95℃下處理18h～20h，水洗至中性，烘干，得到預(yù)處理玉米芯纖維素；其中，所述堿性雙氧水溶液由質(zhì)量濃度5%～7%的雙氧水以及1.5mol/L氫氧化鈉組成；

（2）將纖維素酶以1UI/g玉米芯纖維素的量加入到所述預(yù)處理玉米芯纖維素中，并用蒸餾水調(diào)節(jié)固液比為1：10后置于發(fā)酵罐中，在50℃溫度、120r/min攪拌速度條件下水解16h，得到混合液；

（3）將發(fā)酵罐的溫度降低并保持在37℃～38℃，將戴爾根霉種子液和發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液加入到所述混合液中，在空氣通氣量3L/min～3.5L/min、攪拌速度為180r/min～200r/min條件下，通過流加無菌氫氧化鈣乳液來控制發(fā)酵液pH5.5～6.0，并發(fā)酵66h～78h后，得到富馬酸發(fā)酵液；其中，所述戴爾根霉種子液、發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液以及混合液的體積比為1：1：18。

2.如權(quán)利要求1所述的利用玉米芯纖維素發(fā)酵制備富馬酸發(fā)酵液的方法，其特征在于，在步驟（2）中，所述纖維素酶為依照文獻(xiàn)：“高星星，潘麗軍，楊培周，王秀洋.里氏木霉與黑曲霉混合發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的條件優(yōu)化[J].食品科學(xué)，2012，33(19):193-198”所記載的制備方法制備得到。

3.如權(quán)利要求2所述的利用玉米芯纖維素發(fā)酵制備富馬酸發(fā)酵液的方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述戴爾根霉種子液制備方法為：將濃度為（1～10）×10⁵CFU/mL的戴爾根霉孢子液以體積比1:10接入種子培養(yǎng)基中，在30℃～32℃、180r/min～200r/min條件下培養(yǎng)16h～18h；其中，所述種子培養(yǎng)基組成為：葡萄糖30g/L～40g/L，(NH₄)₂SO₄8g/L～10g/L，酵母浸粉1.5g/L～2.0g/L，KH₂PO₄1.0g/L～1.5g/L，MgSO₄0.3g/L～0.4g/L，MnSO₄0.3g/L～0.4g/L，F(xiàn)eSO₄0.02g/L～0.03g/L。

4.如權(quán)利要求3所述的利用玉米芯纖維素發(fā)酵制備富馬酸發(fā)酵液的方法，其特征在于，所述戴爾根霉菌種為產(chǎn)富馬酸戴爾根霉（Rhizopus?delemar）CICC41341，購(gòu)自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。

5.如權(quán)利要求3所述的利用玉米芯纖維素發(fā)酵制備富馬酸發(fā)酵液的方法，其特征在于，在步驟（2）中，所述發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)液組成為：(NH₄)₂SO₄80.0g/L～100g/L，酵母粉5.0g/L～6.0g/L，KH₂PO₄10g/L～12g/L，MgSO₄·7H₂O6.6g/L～7.2g/L，MnSO₄·H₂O6g/L～7g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O0.40g/L～0.5g/L，以及CaCl₂40g/L～50g/L。