[發明專利]多腫瘤標志物聯測用紙芯片酶聯免疫測試卡

無效

• 申請號: 201410035000.5
• 申請日: 2014-01-24
• 公開（公告）號: CN103743905A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 羅金平;蔡新霞;劉軍濤;石文韜;王蜜霞
• 申請（專利權）人: 中國科學院電子學研究所
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 宋焰琴

技術領域

本發明涉及免疫檢測技術領域，具體地涉及一種能用于多腫瘤標志物聯合檢測的紙芯片酶聯免疫測試卡。

背景技術

腫瘤標志物檢測是近年來發展起來的一項腫瘤診斷的新手段，對于早期診斷、尤其是發現微轉移有著獨特的作用，但單一標志物的檢測對腫瘤的診斷價值有限，而多指標聯合檢測可互補優缺點，提高陽性檢出率。目前對多種腫瘤標志物的定量檢測，主要依賴于傳統的酶聯免疫吸附法(ELISA)和化學發光酶聯免疫法(CLIA)，要配備專用的試劑盒和免疫測定裝置，涉及煩瑣的溶液處理過程，消耗大量昂貴的抗體試劑，分析時間長且操作復雜，不利于實現多指標的臨床現場快速檢測應用。

微流控芯片是uTAS中當前最活躍的領域和發展前沿，它可以將多種單元技術在整體可控的微小平臺上靈活組合、規模集成，能簡化操作、增加分析速度和降低試劑消耗，有望為腫瘤標志物的定量檢測提供簡便快速有效的新方法和新器件。目前已有專利CN202083692U、CN202066861U等公開了基于微流控芯片的腫瘤快速診斷器件，可以分別用于測定胃癌、胰腺癌等癌癥的多種腫瘤標志物；但這些微流控芯片仍是基于玻璃或塑料等構成的微通道，同時要集成多個檢測電極，制作工藝復雜且成本較高。哈佛大學Whitesides小組以濾紙為基底材料構建了成本低的紙基微流控芯片(紙芯片)，并結合ELISA實現了對IgG的定量檢測；濟南大學于京華小組利用絲網印刷或蠟打印方式批量制作了陣列的紙芯片，結合CLIA實現了對癌胚抗原、PSA等腫瘤標志物的定量檢測。與傳統的酶聯免疫分析法相比，這些紙芯片在檢測成本、分析時間方面有明顯改善，但在使用時仍需配備相應的試劑盒，給腫瘤診斷的臨床現場應用帶來不便。

發明內容

(一)要解決的技術問題

本發明的目的是提供一種為腫瘤診斷提供適合臨床現場應用的器件，且制作簡單、靈敏度高、成本低的多腫瘤標志物聯測用紙芯片測試卡。

(二)技術方案

為達到以上目的，本發明提供一種多腫瘤標志物聯測用紙芯片酶聯免疫測試卡，包括上外殼、上層濾紙芯片、雙面膠帶、中間層濾紙芯片、下層濾紙芯片、紙基滑動架、以及下外殼，其上層濾紙芯片、中間層濾紙芯片、下層濾紙芯片分別是具有親水區域、疏水區域交替出現的蠟圖案化濾紙芯片；在上外殼和下外殼之間設置上層濾紙芯片、雙面膠帶、中間層濾紙芯片、下層濾紙芯片和紙基滑動架，在上外殼本體設有進樣窗口和加液窗口，上層濾紙芯片位于上外殼和雙面膠帶之間，中間層濾紙芯片位于雙面膠帶和下層濾紙芯片之間；中間層濾紙芯片上包括預先固定有不同反應試劑的多個敏感區；紙基滑動架位于下層濾紙芯片和下外殼之間；上層濾紙芯片、中間層濾紙芯片通過雙面膠帶粘接為一體；下外殼的底部則開有與紙基滑動架對應的U形窗口，下層濾紙芯片相對上層濾紙芯片、中間層濾紙芯片在紙基滑動架上滑動，以便實現不同反應試劑在多層濾紙芯片之間的順序流動；所述上層濾紙芯片含有進樣孔、疏水蠟區域和上層液流通道；所述雙面膠帶含有引流通道和多個引流孔；所述中間層濾紙芯片含有中間層液流通道和多個敏感區；所述下層濾紙芯片由多個測試孔和不同刻度線、手柄組成；進樣窗口、進樣孔、引流通道以及中間層液流通道均位于測試卡的左側，且各中心垂直線沿測試卡的垂直豎向方向重合；上層液流通道是位于上層濾紙芯片的右側區域上的梳子形液流通道，其梳背緊貼于加液窗口下方且兩者的中心重合，其梳齒與雙面膠帶上的多個引流孔和中間層濾紙芯片上的多個敏感區沿測試卡的垂直豎向方向重合；在下層濾紙芯片上設置有多個測試孔、不同刻度線和手柄，測試孔緊貼于中間層液流通道下方且兩者的中心重合，不同刻度線為平行于測試孔、用于標識下層濾紙芯片的滑動位置的多組虛線，手柄位于下層濾紙芯片上遠離測試孔的一端。

(三)有益效果

該測試卡預先固定有不同酶聯免疫反應試劑，使用時無需另外配備試劑盒，直接利用紙芯片的滑動來控制待測標志物與不同反應試劑的順序接觸和反應，通過結合便攜式光學儀表，即可實現對多種腫瘤標志物的快速定量檢測。

1、本發明在一個物理器件即紙芯片上集成了成熟的酶聯免疫分析技術，將不同試劑預先固定在中間層濾紙芯片上，利用上層濾紙芯片的液流溝道和下層濾紙芯片的滑動來實現液體在多層濾紙芯片之間的順序流動，不僅保留了酶聯免疫分析的高特異和高靈敏度，還大大改善了酶聯免疫分析在現場檢測中的便攜性和可操作性，利于拓展酶聯免疫分析在腫瘤診斷檢測中的現場應用。

2、采用噴蠟打印制作濾紙芯片圖形的方式，可實現紙芯片酶聯免疫測試卡關鍵部件的批量制作，降低了制作成本，提高了測試卡制備和檢測的重復性。