[發明專利]一種檢測羥基自由基濃度的方法

無效

• 申請號: 201410034854.1
• 申請日: 2014-01-24
• 公開（公告）號: CN103776808A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 宋功武;儲濤;朱晶晶;田甜;何瑜
• 申請（專利權）人: 鼎泰（湖北）生化科技設備制造有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

技術領域

本發明涉及一種檢測羥基自由基濃度的方法，尤其涉及一種以Ce³⁺為捕獲劑的檢測羥基自由基濃度的方法。

背景技術

羥基自由基(·0H)是一種氧化能力很強的自由基，具有高度活性，可以通過電子轉移、親電加成、脫氫反應等途徑無選擇地直接與各種有機化合物作用，將有機化合物降解為二氧化碳、水和其他無害物質。因此，將羥基自由基應用于處理環境污染物時具備反應速度快、氧化效率高、無污染等特點。但由于羥基自由基的反應活性大，壽命短，存在濃度低，導致它的檢測存在一定的難度。

目前，檢測羥基自由基的方法主要有電子自旋共振法、高效液相色譜法、化學發光法、分光光度法和熒光分析法等，通過直接或間接方法測定羥基自由基的濃度。其中電子自旋共振法、高效液相色譜法所用儀器昂貴，操作復雜，一般實驗室難以應用。相比其他方法，熒光分析法憑借其儀器簡單、操作方便、靈敏度高、分辨時間段等特點，被廣泛應用于羥基自由基的檢測。

申請號為CN101413896A、CN101241076A的發明專利分別公開了兩種羥基自由基濃度的測定方法。前者提供了一種制備熒光分子探針的方法，并將其應用于測定羥基自由基，該方法靈敏度高、選擇性好且對儀器要求不高，然而該方法使用的是自制備的探針，成本較高，測定機理復雜，影響測定準確度的因素多，不適宜廣泛應用。后者以對苯甲酸鈉鹽為捕獲劑，采用熒光分析法測定了在羥基自由基產生體系的環境pH<12或羥基自由基產生體系的溶液對電導率有求的情況下的羥基自由基濃度，該方法不僅具備了前一種方法的優點，同時克服了它的缺點，但是捕獲劑與羥基自由基的反應途徑不是唯一的，反應之后的羥基化產物種類較多，從而也限制了該方法的使用范圍。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種檢測羥基自由基濃度的方法，解決了現有技術中羥基自由基濃度檢測方法過程麻煩、成本較高、且難以廣泛使用的技術問題。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：一種檢測羥基自由基濃度的方法，包括以下步驟：

（1）配置不同濃度的Ce³⁺標準溶液，用熒光分光光度計測定所述各個濃度的Ce³⁺標準溶液的發射光譜，所述發射光譜橫坐標為所述Ce³⁺標準溶液的熒光波長，縱坐標為所述Ce³⁺標準溶液的熒光強度；

（2）根據所述發射光譜，選擇波峰對應的熒光波長數值，并繪制所述熒光波長數值處，Ce³⁺標準溶液的濃度和所述熒光強度對應關系的標準曲線；

（3）實際測定時將捕獲劑Ce³⁺過量加入羥基自由基產生的體系中，所述捕獲劑Ce³⁺與體系中的羥基自由基反應后氧化生成Ce⁴⁺，采用熒光分光光度計檢測所述反應溶液，得到所述反應溶液的發射光譜；

（4）根據所述反應溶液的發射光譜，得到步驟（2）中確定的熒光波長數值對應的熒光強度，并通過步驟（2）繪制的標準曲線得到反應溶液中剩余捕獲劑Ce³⁺的濃度，計算得到反應消耗的捕獲劑Ce³⁺的濃度，即得到所述羥基自由基的濃度。

進一步，步驟（1）和步驟（3）中，測定所述發射光譜時采用的熒光最大激發波長為250nm。

進一步，步驟（2）和步驟（4）中，波峰對應的熒光波長數值為366nm。

進一步，所述Ce³⁺標準溶液的濃度范圍為0～5×10^-4mol/L。

本發明的有益效果是：本發明的技術方案提供了一種簡單易行、準確可靠、反應途徑唯一、反應產物單一的羥基自由基濃度檢測方法，不僅檢測成本較低，而且可以廣泛適用于各種產生羥基自由基的體系，尤其適用于超聲體系。

附圖說明

圖1為本發明檢測羥基自由基濃度的方法流程圖；

圖2為本發明實施例1反應溶液的發射光譜。

具體實施方式

以下結合附圖對本發明的原理和特征進行描述，所舉實例只用于解釋本發明，并非用于限定本發明的范圍。