[發明專利]一種免疫復合物緩沖解離劑及其應用

有效

• 申請號: 201410033277.4
• 申請日: 2014-01-23
• 公開（公告）號: CN103777006A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 成軍;戴玉柱;江曉肖;張益明;馬炬明;陳達偉;孫長貴;王國政
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第一一七醫院
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564;G01N33/531
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所 33233
• 代理人: 王梨華;陳麗霞

1.一種免疫復合物緩沖解離劑，其特征在于：以如下體積比例配比計，各組分及含量為，135μl-165μl的CIC分離劑、290μl-315μl的CIC洗滌劑、5μl-16μl的CIC復溶劑、65μl-76μl的CIC抗原緩沖液解離劑和65μl-76μl的CIC抗原緩沖液解離中和劑；

其中，每1L的CIC分離劑包括以下組分：5.2g-7.7g的硼砂、4.1g-6.1g的硼酸、70g-90g的聚乙二醇、6.2g-9.2g的氯化鈉、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水；

每1L的CIC洗滌劑包括以下組分：5.2g-7.7g的硼砂、4.1g-6.1g的硼酸、35g-45g的聚乙二醇、8.0g-11.7g的氯化鈉、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水；

每1L的CIC復溶劑包括以下組分：8.0g-9.5g的氯化鈉、0.01g-0.03g的氫氧化鈉、50μl-500μl的聚乙二醇辛基苯基醚、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水。

2.權利要求1所述的一種免疫復合物緩沖解離劑，其特征在于：每1L的CIC抗原緩沖液解離劑包括以下組分：3.5g-5.5g的甘氨酸、9.0ml-15.0ml質量分數為35%-37%的濃鹽酸、0.35g-0.51g的氯化鈉、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水。

3.權利要求2所述的一種免疫復合物緩沖解離劑，其特征在于：每1L的CIC抗原緩沖液解離中和劑包括以下組分：16g-24g的氨基丁三醇、5.7g-8.6g的氯化鈉、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水。

4.權利要求3所述的一種免疫復合物緩沖解離劑應用于患有感染性疾病、內分泌代謝性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤疾病患者的血清、胸腹水、尿液、腦脊液、關節腔液的CIC中抗原的檢測。

5.一種利用根據權利要求3所述的免疫復合物緩沖解離劑檢測CIC的方法，其特征在于：檢測CIC中抗原的方法，由下述步驟組成，

A.分離：向2支1ml的離心管分別加入150μl待測樣本，再分別加入135μl-165μl的CIC分離劑；混勻后，在37℃放置30min，進行離心，離心結束后棄去上清液；

B.洗滌：向兩支離心管中，分別加入290μl-315μl的CIC洗滌劑，離心后，棄去上清液，并將CIC沉淀物瀝干；

C.復溶：分別向含有瀝干的CIC沉淀物的離心管中，加入5μl-16μl的CIC復溶劑，離心管安裝于振蕩器上，振蕩至溶液中無塊狀沉淀物；

D.空白樣品檢測：將一支離心管標記為空白樣品管，并加入65μl-76μl的抗原緩沖液解離劑和65μl-76μl的抗原緩沖液解離中和劑，混勻后檢測HBsAg，將檢測結果作為空白值；

E.CIC抗原解離：將另一支離心管標記為測定樣品管，并加入65μl-76μl的抗原緩沖液解離劑，在56℃空氣孵育放置30min或在42℃水浴放置30min，得到解離液；

F.CIC抗原解離中和：向步驟E中得到的解離液中，加入65μl-76μl抗原緩沖液解離中和劑，混勻后檢測HBsAg，將檢測結果作為測定值。

6.一種免疫復合物緩沖解離劑，其特征在于：以如下體積比例配比計，各組分及含量為，135μl-165μl的CIC分離劑、290μl-315μl的CIC洗滌劑、5μl-16μl的CIC復溶劑、65μl-76μl的CIC抗體緩沖液解離劑和65μl-76μl的CIC抗體緩沖液解離中和劑；

其中，每1L的CIC分離劑包括以下組分：5.2g-7.7g的硼砂、4.1g-6.1g的硼酸、70g-90g的聚乙二醇、6.2g-9.2g的氯化鈉、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水；

每1L的CIC洗滌劑包括以下組分：5.2g-7.7g的硼砂、4.1g-6.1g的硼酸、35g-45g的聚乙二醇、8.0g-11.7g的氯化鈉、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水；

每1L的CIC復溶劑包括以下組分：8.0g-9.5g的氯化鈉、0.01g-0.03g的氫氧化鈉、50μl-500μl的聚乙二醇辛基苯基醚、100μl-500μl的液體生物防腐劑、余量為蒸餾水。