[發明專利]一種定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法

無效

• 申請號: 201410033219.1
• 申請日: 2014-01-24
• 公開（公告）號: CN103792367A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 金先慶;金鑫;李曉慶;陳建飛;李勤;王佚;向麗;廖飛
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學附屬兒童醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明屬于美克爾憩室檢測技術領域，尤其涉及一種定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法。

背景技術

美克爾憩室是消化道最常見的先天性畸形。正常人群發生率高達2%～4%，終身發病率為4%～6%。美克爾憩室病不易術前診斷，是普外科常見的鑒別疾病。目前，美克爾憩室的診斷主要依靠锝99檢查，其敏感度85%、特異度67%，價錢昂貴耗時長，具有放射性，僅少數醫院購置；其次依靠腹腔鏡及術中診斷，是有創檢查。當今臨床上有外周血檢測異位組織抗體診斷子宮內膜異位癥技術的成熟技術，但空缺外周血診斷美克爾憩室的檢驗方法。

發明內容

本發明實施例的目的在于提供一種定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法，旨在解決現有缺少外周血診斷美克爾憩室檢驗方法的問題。

本發明實施例是這樣實現的，一種定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法，該定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法包括以下步驟：

第一步，將美克爾憩室和無美克爾憩室小腸雙向蛋白電泳，依據蛋白質電荷及分子量差異將蛋白質分散于凝膠，應用蛋白質組學技術分析差異性蛋白并得出具體蛋白名稱，選取差異最明顯的蛋白進行實驗；

第二步，用免疫組化、定量PCR法檢查美克爾憩室和無美克爾憩室小腸組織和血液中的特異性基因蛋白的表達實付和前相符合；

第三步，抽取患兒外周血，上肢淺表靜脈，放置于查肝腎功能管內4℃保存，24小時內檢測，確保蛋白質不變性；提取患兒外周血RNA，逆轉錄為cDNA，應用定量PCR法檢測美克爾憩室特異抗原基因含量，單位為循環數c；提取外周血蛋白質，定量化后應用ELISA法檢查每毫升美克爾憩室特異抗原蛋白質量，單位為微克，匹克；

并與手術結果對比，大量樣本試驗后應用統計學軟件計算常值范圍；

第四步，檢測疑是患者美克爾憩室特異抗原及基因含量長期改善。

進一步，該定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法包括：

將美克爾憩室和無美克爾憩室小腸雙向蛋白電泳，比較差異蛋白并得出具體蛋白名稱，選取差異最明顯的蛋白進行實驗；

用免疫組化、定量PCR法檢查美克爾憩室和無美克爾憩室小腸組織和血液中的特異性基因蛋白的表達實付和前相符合；

定量PCR法檢測美克爾憩室和無美克爾憩室人群血液中的特異性基因的表達，判斷正常值范圍，并與手術結果對比；

定量PCR法檢測疑是患者，并與手術結果對比。

本發明提供的定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法，通過將美克爾憩室和無美克爾憩室小腸雙向蛋白電泳，比較差異蛋白并得出具體蛋白名稱，選取差異最明顯的蛋白進行實驗；用免疫組化、定量PCR法檢查美克爾憩室和無美克爾憩室小腸組織和血液中的特異性基因蛋白的表達實付和前相符合；定量PCR法檢測美克爾憩室和無美克爾憩室人群血液中的特異性基因的表達，判斷正常值范圍，并與手術結果對比；定量PCR法檢測疑是患者，并與手術結果對比，實現了外周血診斷美克爾憩室的檢驗，降低了檢測者的費用，提高了效率，避免了對檢測者的二次傷害。本發明的操作簡單，檢測效率較高，是一種可靠的美克爾憩室病特異抗原檢測方法。

附圖說明

圖1是本發明實施例提供的定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法流程圖。

具體實施方式

為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

下面結合附圖及具體實施例對本發明的應用原理作進一步描述。

如圖1所示，本發明實施例的定量檢測美克爾憩室病特異抗原的方法包括以下步驟：

S101：將美克爾憩室和無美克爾憩室小腸雙向蛋白電泳，比較差異蛋白并得出具體蛋白名稱，選取差異最明顯的蛋白進行實驗；

S102：用免疫組化、定量PCR法檢查美克爾憩室和無美克爾憩室小腸組織和血液中的特異性基因蛋白的表達實付和前相符合；

S103：定量PCR法檢測美克爾憩室和無美克爾憩室人群血液中的特異性基因的表達，判斷正常值范圍，并與手術結果對比；

S104：定量PCR法檢測疑是患者，并與手術結果對比。

本發明的具體步驟為：

第一步初步篩選：將美克爾憩室和無美克爾憩室小腸雙向蛋白電泳，比較差異蛋白并得出具體蛋白名稱，選取差異最明顯的蛋白進行實驗；