[發明專利]疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體、編碼基因及其應用

有效

• 申請號: 201410032400.0
• 申請日: 2014-01-23
• 公開（公告）號: CN103981160B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發明（設計）人: 鄭裕國;鄭仁朝;黎小軍;馬紅葉;沈寅初
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N9/20
• 分類號: C12N9/20;C12N15/55;C12P13/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司33201
• 代理人: 黃美娟,冷紅梅

1.一種疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體，由序列如下的肽段經點突變獲得：RPVRRAVPQD?LLDQFELFSQ?YSAAAYCAAN?NHAPVGSDVT?CSENVCPEVD?AADATFLYSF?EDSGLGDVTG?LLALDNTNKL?IVLSFRGTRS?VENWIANLNA?DLTEISDICS?GCEGHDGFVT?SWRSVADTIR?EQVQNAVNEH?PDYRVVFTGH?SLGGALATIA?AAALRGNGYN?IDVFSYGAPR?VGNRAFAEFL?TAQTGGTLYR?ITHTNDIVPR?LPPRDWGYSH?SSPEYWVTSG?NDVPVTANDI?TVVEGIDSTD?GNNQGNIPDI?PSHLWYFGPI?SECD；所述的點突變為下列之一或兩者結合：（1）第63位的S突變為L或M；（2）第232位的D突變為A。

2.如權利要求1所述的疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體，其特征在于所述嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體序列如下：RPVRRAVPQD?LLDQFELFSQ?YSAAAYCAAN?NHAPVGSDVT?CSENVCPEVD?AADATFLYSF?EDLGLGDVTG?LLALDNTNKL?IVLSFRGTRS?VENWIANLNA?DLTEISDICS?GCEGHDGFVT?SWRSVADTIR?EQVQNAVNEH?PDYRVVFTGH?SLGGALATIA?AAALRGNGYN?IDVFSYGAPR?VGNRAFAEFL?TAQTGGTLYR?ITHTNDIVPR?LPPRDWGYSH?SSPEYWVTSG?NAVPVTANDI?TVVEGIDSTD?GNNQGNIPDI?PSHLWYFGPI?SECD。

3.如權利要求1所述的疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體，其特征在于所述嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體序列如下：RPVRRAVPQD?LLDQFELFSQ?YSAAAYCAAN?NHAPVGSDVT?CSENVCPEVD?AADATFLYSF?EDLGLGDVTG?LLALDNTNKL?IVLSFRGTRS?VENWIANLNA?DLTEISDICS?GCEGHDGFVT?SWRSVADTIR?EQVQNAVNEH?PDYRVVFTGH?SLGGALATIA?AAALRGNGYN?IDVFSYGAPR?VGNRAFAEFL?TAQTGGTLYR?ITHTNDIVPR?LPPRDWGYSH?SSPEYWVTSG?NDVPVTANDI?TVVEGIDSTD?GNNQGNIPDI?PSHLWYFGPI?SECD。

4.如權利要求1所述的疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體，其特征在于所述嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體序列如下：RPVRRAVPQD?LLDQFELFSQ?YSAAAYCAAN?NHAPVGSDVT?CSENVCPEVD?AADATFLYSF?EDMGLGDVTG?LLALDNTNKL?IVLSFRGTRS?VENWIANLNA?DLTEISDICS?GCEGHDGFVT?SWRSVADTIR?EQVQNAVNEH?PDYRVVFTGH?SLGGALATIA?AAALRGNGYN?IDVFSYGAPR?VGNRAFAEFL?TAQTGGTLYR?ITHTNDIVPR?LPPRDWGYSH?SSPEYWVTSG?NAVPVTANDI?TVVEGIDSTD?GNNQGNIPDI?PSHLWYFGPI?SECD。

5.編碼權利要求1～4之一所述疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體的基因。

6.如權利要求5所述的基因，其特征在于所述基因為下列之一：SEQ?ID?NO.4，SEQ?ID?NO.6，SEQ?ID?NO.8。

7.如權利要求1所述的疏綿狀嗜熱絲孢菌脂肪酶突變體在水解外消旋2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯制備普瑞巴林關鍵手性中間體(3S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸中的應用。