[發明專利]龜甲膠多肽的制備方法和制藥新用途

在審

• 申請號: 201410030670.8
• 申請日: 2014-01-22
• 公開（公告）號: CN104232714A
• 公開（公告）日: 2014-12-24
• 發明（設計）人: 史宗潔;張榕村;韋山;張濤
• 申請（專利權）人: 湖北老中醫制藥有限責任公司;史宗潔
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/01;A61P35/00;A23L1/29
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

技術領域

本發明涉及制備龜甲膠多肽的方法，以及龜甲膠多肽的新用途。

背景技術

動物膠原類物質是動物的基本組成成分，是動物及人體組織結構的基礎，如，空腔器官、血管、骨骼、臟器等，其分子結構是進化中最保守的，因而在人類應用中是最不易引起過敏反應的一類物質，在我國中醫藥中被廣泛應用，如取自驢皮的阿膠、龜甲動物的龜甲膠等，均廣泛用于我國中醫藥散結化瘀、創傷修復、補血養顏等方面。

龜甲膠的主要成分是蛋白質、骨膠原、脂肪、鈣、磷、肽類和多種酶以及多種人體必需微量元素。龜甲膠水溶液中含有多肽、氨基酸、微量元素等成分，有抗凝血、增加冠脈含量、提高耐缺氧功能、促進免疫等作用，可以廣泛用于營養食品和藥品。

發明內容

本發明目的在于提供一種龜甲膠的酶解方法，以及該方法制備得到的龜甲膠多肽及其制備抗腫瘤藥物的用途。

本發明酶解龜甲膠的方法，包括如下步驟：

（1）取龜甲膠，加水煮沸溶解，得龜膠液；

（2）調節龜膠液pH至6.9～9.0，在48～52℃的條件下，加入廣西酶至濃度為0.3～3.0g/L，恒溫反應0.5～4h；

（3）再調節溶液pH至8.0～9.0，在53～57℃的條件下，加入堿性蛋白酶至濃度為0.3～3.0g/L，恒溫反應0.5～4h；

（4）然后再調節溶液pH至6.0～9.0，在48℃～52℃的條件下，加入風味酶至濃度為0.3～3.0g/L，恒溫反應0.5～4h；

（5）升溫至75～90℃，保溫3～15分鐘，使酶失活；

（6）抽濾，得濾液，濃縮，干燥，即得龜甲膠多肽。

步驟（1）中，龜膠液的濃度為50～120g/L。優選地，所述龜膠液的濃度為80g/L。

步驟（2）中，所述pH優選為7.3～7.7，進一步優選為7.5；所述溫度優選為49～51℃，進一步優選為50℃；所述廣西酶的濃度優選為0.55～0.75g/L，進一步優選為0.64g/L；所述反應的時間優選為1.5～2.5h，進一步優選為2h。

步驟（3）中，所述pH優選為8.0～8.2，進一步優選為8.0；所述溫度優選為54～56℃，進一步優選為55℃；所述堿性蛋白酶的濃度優選為1.5～1.7g/L，進一步優選為1.6g/L；所述反應的時間優選為1.5～2.5h，進一步優選為2h。

步驟（3）中，所述堿性蛋白酶為alcalase。

步驟（4）中，所述pH優選為6.8～7.2，進一步優選為7.0；所述溫度優選為49～51℃，進一步優選為50℃；所述風味酶的濃度優選為0.3～0.5g/L，進一步優選為0.4g/L；所述反應的時間優選為1.5～2.5h，進一步優選為2h。

步驟（5）中，所述溫度為80℃，所述保溫時間為10min。

本發明還提供了前述任意一項方法制備得到的龜甲膠多肽。

本發明還提供了前述龜甲膠多肽在制備抗腫瘤的特殊膳食食品、藥品或者保健品中的用途。其中，所述腫瘤未肉瘤或者肺癌。

特殊膳食營養品，是指在腫瘤治療過程中的具有營養支持作用的營養食品。

本發明還提供了龜甲膠多肽在制備用于腫瘤輔助治療的特殊膳食食品、藥品或者保健品中的用途。其中，所述腫瘤未肉瘤或者肺癌。

本發明還提供了一種抗腫瘤或者用于腫瘤輔助治療的藥品、特殊膳食食品或者保健品，它是以前述龜甲膠多肽為活性成分，加上藥品、食品或保健食品上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。

本發明方法制備得到的龜甲膠多肽，可以有效抑制腫瘤的生長，對肉瘤和肺癌的療效確切，副作用小，為臨床抗腫瘤或腫瘤輔助治療的藥物、特殊膳食食品或保健食品提供了一種新的選擇，臨床應用前景良好。

顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。

附圖說明

圖1龜甲膠多肽組與對照組的腫瘤（肉瘤）大小比對圖；

圖2龜甲膠多肽組與對照組的實驗解剖圖；

圖3龜甲膠多肽組與對照組小鼠外觀比對圖；

圖4龜甲膠多肽組和對照組腫瘤（肺癌）組織外觀圖；

圖5龜甲膠多肽組與對照組腫瘤（肺癌）鏡下觀察比對圖（400倍鏡下）。

具體實施方式