[發明專利]咪唑喹啉在抑制精子運動中的應用

有效

• 申請號: 201410030032.6
• 申請日: 2014-01-22
• 公開（公告）號: CN103784440A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 周洪;朱星星;溫爽;陳云
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: A61K31/437
• 分類號: A61K31/437;A61P15/18
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌;唐循文

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及咪唑喹啉在抑制精子運動藥物方面的應用。

背景

在世界人口飛速增長的時代，如何安全有效節育一直困擾著人類。繼女性節育后，男性抗生育研究已成為研究熱點。目前男性節育的方法主要有：藥物避孕和手術避孕。最常用的口服避孕藥為甾體避孕藥，由于是激素類藥物，影響了正常體內的激素代謝，對人體各系統都有不同程度的影響，其前景無法預知。一些非甾體避孕藥如棉酚和雷公藤，由于具有較大的毒性和不可復性不能廣泛應用。手術避孕主要是輸精管結扎術，同樣具有不可復性等問題。因此，人們將目光轉向了研究安全，不良反應小的外用避孕藥。

發明內容

解決的技術問題：本發明提供一種咪唑喹啉在抑制精子運動藥物方面應用的方案，可用于避孕及其藥物。

技術方案：咪唑喹啉化合物R848在抑制精子運動中的應用。

咪唑喹啉化合物R848在制備抑制精子運動藥物中的應用。

咪唑喹啉化合物R848在制備避孕藥物中的應用。

一種避孕藥，有效成分為咪唑喹啉化合物R848

有益效果：

咪唑喹啉化合物R848激活TLR7/8后，可以顯著抑制小鼠和人精子的總運動，前向運動，平均路徑速率，直線速率，曲線速率以及獲能，臨床上可用于避孕及相關藥物中。本發明所用咪唑喹啉化合物R848是非激素類藥物，沒有激素類藥物的副作用。

附圖說明

圖1為R848對小鼠精子運動的劑量依賴性抑制。a圖代表的是不同劑量R848處理后，小鼠精子總運動百分比明顯下降，與對照組相比具有顯著差異；b圖代表的是不同劑量R848處理后，小鼠精子前向運動百分比明顯下降，與對照組相比具有顯著差異；

圖2為流式細胞儀檢測R848處理后小鼠精子的凋亡。a圖代表的是設門分選對象，對門內的細胞進行研究；b圖代表的是空白組；c圖代表的是Annexin?V單染組；d圖代表的是PI單染組；e圖代表的是生理鹽水處理后加Annexin?V-PI雙染組；f圖代表的是R848處理后加Annexin?V-PI雙染組；R848處理6小時后凋亡精子所占的比例與對照組相比沒有統計學差異。

圖3為R848對人精子運動的劑量依賴性抑制。a圖代表的是不同劑量R848處理后，人精子總運動率明顯下降，與對照組相比具有顯著差異；b圖代表的是不同劑量R848處理后，人精子漸進性運動所占比例明顯下降，與對照組相比具有顯著差異；

圖4為R848對人精子運動的時間依賴性抑制。測定的時間點為：0，1，2，4，6小時，R848處理后，隨著時間的延長，人精子總運動百分比與對照組相比有所下降，1小時的時候已經降低35%（圖4a）；人精子前向運動百分比與對照組相比呈下降趨勢，4小時下降80%，6小時下降83%（圖4b）；平均路徑速度與對照組相比呈下降趨勢，4小時下降50%（圖4c）；直線速度與對照組相比呈下降趨勢，在前2小時沒有明顯差異，4小時的時候則可以下降54%（圖4d）；曲線速度與對照組相比呈下降趨勢，在2小時后有明顯差異，4小時可降低40%（圖4e）；獲能百分比顯示，處理后，獲能百分比維持在0附近，與對照組相比具有顯著差異（圖4f）。

具體實施方式

下面的實施例可使本專業技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。

實施例1

R848對小鼠精子運動的劑量依賴性抑制實驗

1、方法：試驗所需藥品的來源：R848購自Invivogen公司，小鼠精子采用上游法（見步驟說明：上游法純化小鼠精子）取自10周齡左右的C57BL/6小鼠附睪尾，以HTF-HEPES培養液調整精子密度為5×10⁶。標本中分別加入1，5，10μg/mL?R848，37℃，5%CO₂培養箱中培養6小時，用CASA分析檢測，重復6次，試驗結果用SPSS統計軟件分析。

2、結果：見圖1，加入1，5，10μg/mL?R848后，小鼠精子的總運動百分比，前向運動百分比明顯降低，與空白對照組相比具有顯著性差異。1μg/mL?R848對小鼠精子總運動的抑制率可以達到60%，10μg/mL?R848對小鼠精子總運動的抑制率可以達到80%。不同濃度的R848均可將精子前向運動抑制到1%甚至更低。顯示R848能顯著干擾小鼠精子總運動和前向運動。

3、步驟說明：上游法純化小鼠精子

a.配置含10%FCS(Gbico)的HTF?HEPES（InVitroCare）培養液。