[發明專利]四種常見人皰疹病毒熒光定量PCR檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201410026784.5
• 申請日: 2014-01-21
• 公開（公告）號: CN103820573A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 舒強;尚世強;杜立中;陶然;李偉
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

1.四種常見人皰疹病毒熒光定量PCR檢測試劑盒，所述常見人皰疹為HSV-1、HSV-2、EBV和HCMV，該檢測試劑盒由定量PCR反應液（1）、定量反應液（2）、HSV-1標準品（3）、HSV-2標準品（4）、EBV標準品（5）、HCMV標準品（6）、陰性對照品（7）、HSV-1陽性對照品（8）、HSV-2陽性對照品（9）、EBV陽性對照品（10）、HCMV陽性對照品（11）、說明書（12）和盒體（13）組成；

其中定量PCR反應液含有PCR緩沖液、MgCl₂、dNTPs、耐熱DNA聚合酶、通用上游擴增引物、通用下游擴增引物、HSV-1熒光探針和HSV-2熒光探針，

定量反應液含有PCR緩沖液、MgCl₂、dNTPs、耐熱DNA聚合酶、通用上游擴增引物、通用下游擴增引物、EBV下游擴增引物、EBV熒光探針和HCMV熒光探針，

通用上游擴增引物：5’-TCATCTACGGGGACACGGAC-3’，

通用下游擴增引物：5’-CGCACCAGATCCACGCCCTT-3’，

EBV下游擴增引物：5’-GAGCTCCACCCCCTTCATC-3’，

HSV-1熒光探針：5’FAM-GCGGCACAGCACAAAGATG-BHQ-1-3’，

HSV-2熒光探針：5’HEX-GCGGCACAAAACGAAAATG-BHQ-1-3’，

EBV熒光探針：5’FAM-?GCACTCGATAAACAGCGAG-BHQ-1-3’，

HCMV熒光探針：5’HEX-?GAAAGCGGACAAACACGCT-BHQ-1-3’，

HSV-1標準品序列為：TCATCTACGG?GGACACGGAC?TCCATCTTTG?TGCTGTGCCG?CGGCCTCACG?GCCGCCGGGC?TGACGGCCGT?GGGCGACAAG?ATGGCGAGCC?ACATCTCGCG?CGCGCTGTTT?CTGTCCCCCA?TCAAACTCGA?GTGCGAAAAG?ACGTTCACCA?AGCTGCTGCT?GATCGCCAAG?AAAAAGTACA?TCGGCGTCAT?CTACGGGGGT?AAGATGCTCA?TCAAGGGCGT?GGATCTGGTG?CG，

HSV-2標準品序列為：TCATCTACGG?GGACACGGAC?TCCATTTTCG?TTTTGTGCCG?CGGCCTCACG?GCCGCGGGCC?TGGTGGCCAT?GGGCGACAAG?ATGGCGAGCC?ACATCTCGCG?CGCGCTGTTC?CTCCCCCCGA?TCAAGCTCGA?GTGCGAAAAA?ACGTTCACCA?AGCTGCTGCT?CATCGCCAAG?AAAAAGTACA?TCGGCGTCAT?CTGCGGGGGC?AAGATGCTCA?TCAAGGGCGT?GGATCTGGTG?CG，

EBV標準品序列為：TCATCTACGG?GGACACGGAC?TCGCTGTTTA?TCGAGTGCCG?GGGGTTTTCA?GAGAGCGAGA?CCCTGCGCTT?TGCCGAGGCC?CTGGCCGCCC?ACACCACCCG?GAGCCTGTTT?GTGGCCCCCA?TCTCCCTGGA?GGCCGAGAAG?ACCTTCTCCT?GCCTGATGCT?GATTACAAAG?AAGAGATATG?TGGGGGTGCT?GACGGACGGC?AAGACCCTGA?TGAAGGGGGT?GGAGCTC，

HCMV標準品序列為：TCATCTACGG?GGACACGGAC?AGCGTGTTTG?TCCGCTTTCG?TGGCCTGACG?CCGCAGGCTC?TGGTGGCGCG?TGGGCCCAGC?CTGGCGCACT?ACGTGACGGC?CTGTCTTTTT?GTGGAGCCCG?TCAAGCTGGA?GTTTGAAAAG?GTCTTCGTCT?CTCTTATGAT?GATCTGCAAG?AAACGTTACA?TCGGCAAAGT?GGAGGGCGCC?TCGGGTCTGA?GCATGAAGGG?CGTGGATCTG?GTGCG。

2.根據權利要求1所述的四種常見人皰疹病毒熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于，陰性對照為無菌注射用水樣品，HSV-1陽性對照、HSV-2陽性對照、EBV陽性對照、HCMV陽性對照分別為HSV-1、HSV-2、EBV、HCMV滅活病毒株樣品。

3.根據權利要求1所述的四種常見人皰疹病毒熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于，本發明試劑盒保存于-20℃，減少反復凍融。