[發(fā)明專利]旋毛蟲副肌球蛋白的補(bǔ)體功能相關(guān)抗原表位及抗體

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410023652.7
• 申請日: 2014-01-20
• 公開（公告）號: CN103724402A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 諸欣平;楊靜;趙夕;郝瑜婉
• 申請（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K14/435;C07K16/18;C12N15/12;C12N15/63;C12N5/20;A61K39/00;A61K39/395;A61P33/10;C12R1/91
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 劉海羅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于免疫生物學(xué)領(lǐng)域，涉及旋毛蟲副肌球蛋白的補(bǔ)體功能相關(guān)抗原表位及抗體。

背景技術(shù)

旋毛蟲?。═richinellosis）是一種常見的食源性人獸共患寄生蟲病，嚴(yán)重危害人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)。旋毛蟲病呈世界性分布，目前在俄羅斯及東歐國家、拉美國家及泰國等地流行嚴(yán)重。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）最新統(tǒng)計結(jié)果，1986～2009年間，有41個國家報道了旋毛蟲病的流行，病例達(dá)65,818人（Murrell,K.D.and?E.Pozio,Worldwide?occurrence?and?impact?of?human?trichinellosis,1986-2009.Emerg?Infect?Dis,2011.17(12):p.2194-202）。我國是世界上旋毛蟲病危害最嚴(yán)重的國家之一，故該病不僅被列為我國三大食源性人獸共患寄生蟲病之一，同時也是政府提出的讓人民吃上“放心肉”的首檢和必檢的人獸共患病病種。伴隨我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展和生活水平提高，人們的飲食習(xí)慣和飲食譜也隨之發(fā)生改變。近年來由于生食、涮、烤等食肉方式的多樣化，加之人們越來越多地食用狗肉及野生動物肉類，使得我國旋毛蟲病發(fā)病率呈上升趨勢。2004～2009年間，僅西南三省就暴發(fā)旋毛蟲病15起，總病例1,387人，死亡4人（Cui,J.,Z.Q.Wang?and?B.L.Xu,The?epidemiology?of?human?trichinellosis?in?China?during?2004-2009.Acta?Trop,2011.118(1):p.1-5）。衛(wèi)生部“第二次全國人體重要寄生蟲病現(xiàn)狀調(diào)查”結(jié)果顯示，旋毛蟲病血清陽性率平均高達(dá)3.38%（抽樣調(diào)查9.3萬人血清）（許隆祺等,全國人體重要寄生蟲病現(xiàn)狀調(diào)查報告.中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志,2005.23第5期增刊），某些流行區(qū)（云南）人群感染陽性率高達(dá)8.26%，提示當(dāng)前我國旋毛蟲病流行形勢比較嚴(yán)峻。

副肌球蛋白（paramyosin）是多種無脊椎動物主要的結(jié)構(gòu)蛋白，脊椎動物則無此蛋白（Gobert,G.N.and?D.P.McManus,Update?on?paramyosin?in?parasitic?worms.Parasitol?Int,2005.54(2):p.101-7）。早期的研究認(rèn)為副肌球蛋白的功能只是參與肌原纖維的聚集和粗肌絲的組裝，在肌肉收縮機(jī)制中起作用(Elfvin,M.,R.J.Levine?and?M.M.Dewey,Paramyosin?in?invertebrate?muscles.I.Identification?and?localization.J?Cell?Biol,1976.71(1):p.261-72)。旋毛蟲的副肌球蛋白基因（Ts-Pmy?GenBank?accession?No.:EF429310）全長為2996bp，其開放讀碼框架（ORF）2655bp，編碼885個氨基酸，理論分子量為102kDa。

旋毛蟲副肌球蛋白Ts-Pmy是一個具有前景的抗旋毛蟲病疫苗候選抗原分子，將其免疫動物后可誘導(dǎo)產(chǎn)生Th1/Th2混合型免疫應(yīng)答，產(chǎn)生的免疫保護(hù)力導(dǎo)致36.2%的肌幼蟲減蟲率（Yang,J.,et?al.,Identification?and?characterization?of?a?full-length?cDNA?encoding?paramyosin?of?Trichinella?spiralis.Biochem?Biophys?Res?Commun,2008.365(3):p.528-33)。隨后的研究發(fā)現(xiàn)：旋毛蟲副肌球蛋白Ts-Pmy可分布在新生幼蟲和成蟲的肌層及體表；蟲體體表的Ts-Pmy可與補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物（membrane?attackcomplex，MAC）中的重要組分C9結(jié)合，抑制C9聚合反應(yīng)，進(jìn)而阻礙宿主MAC的組裝，使旋毛蟲得以部分逃避宿主補(bǔ)體系統(tǒng)的殺傷；反之，用抗Ts-Pmy抗體封閉蟲體體表的Ts-Pmy，則增強(qiáng)了宿主補(bǔ)體系統(tǒng)對蟲體的殺傷效應(yīng)，揭示了除可作為抗旋毛蟲病疫苗候選抗原分子外，旋毛蟲Ts-Pmy還具有免疫調(diào)節(jié)功能，參與蟲體的免疫逃避作用（Zhang,Z.,et?al.,Trichinella?spiralis?paramyosin?binds?to?C8and?C9and?protects?the?tissue-dwelling?nematode?from?being?attacked?by?host?complement.PLoS?Negl?Trop?Dis,2011.5(7):p.e1225）。